t4dna+ligase储存条件

上英骆2451建立dna连接体系时应注意什么 -
严录裴17568309907 ______ 1)10xLigationBuffer含有ATP,使用前应在室温放置至融化或用手掌温度辅助融化,然后置于冰上.不要加热融化以免ATP降解. 2)T4DNALigase对热敏感,容易失活.使用时请放置冰上,用后立即置冰箱中冷冻保存. 3)如需在接反应后灭活T4DNALigase,可于65℃孵育10min即可.

上英骆2451DNA聚合酶和连接酶作用有何区别? -
严录裴17568309907 ______ DNA聚合酶(DNA polymerase)是细胞复制DNA的重要作用酶. DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板,从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶. DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、dNTP等的情况下)及其相辅的活性...

上英骆2451dna连接酶存在那种生物?在生物中有何作用 -
严录裴17568309907 ______ 严格来说,上述叙述不正确.大肠杆菌在一般情况下,只能将粘性末端连接起来,所以当你只想将体系中的粘性末端连接,而平端不连接时,就选这个酶.但是当反应体系加入适量PEG,大肠杆菌dna连接酶也能将平端连接【参考文献: Harrison, B. and Zimmerman, S.B.1983 Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 80:5852-5856.】 所以,E.coli dna ligase本身也具备连接平端能力,只是条件苛刻而已.

上英骆2451下列说法正确的是
严录裴17568309907 ______ A.DNA连接酶(DNA ligase)是1967年在三个实验室同时发现的,最初是在大肠杆菌细胞中发现的. 它是一种封闭DNA链上缺口的酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键.但这两条链...

上英骆2451为什么平端连接效率比黏端连接要低? -
严录裴17568309907 ______[答案] 楼上的不懂不要瞎说,误导人家.这两种连接键都是磷酸二酯键,没有区别的. 连接效率之所以比较低,原因之一是在连接过程中只有连接酶的作用,缺乏粘性末端那样突出碱基的互补作用;原因之二是常用的T4DNAligase对于平末端的Km值比粘性末...

上英骆2451一个基因经过多次转录形成三种rna为什么不对,一定要说清楚.错在多次转录.咋回事? -
严录裴17568309907 ______ 一个基因转录后只能形成1种RNA,特定的基因转录只能形成特定的一种RNA. 转录就是遗传信息从基因转移到RNA形成前体RNA再经修饰形成mRNA(信使RNA),同一基因转录无论多少次也只有mRNA,再下去才有其他的tRNA和rRNA

上英骆2451RNA是否有连接酶?有的话又叫什么名字?连接位点又是什么的?大神们帮帮忙 -
严录裴17568309907 ______ 有啊,T4 RNA连接酶,很多地方有卖的. 以NEB为例,有T4 RNA连接酶1和2.1可以连接单链RNA,2连接双链RNA. 原理与T4 DNA ligase一样,连接酶都是催化5'3'之间的磷酸二酯键的形成.

上英骆2451酶切线性基因比环状质粒容易?酶切线性基因比环状质粒容易吗
严录裴17568309907 ______ 不容易,1)E2也可以识别E1的酶切序列(都有GATC) 2)E2切下来漏出的末端可能可以... 最终发生DNA的链接(在T4 ligase作用下) b 如果两个酶切留下的都是平端,那么平...

上英骆2451DNA连接酶的种类及区别?限制酶和DNA连接酶作用的化学键分别是什么?载体的条件是?(3点 ) -
严录裴17568309907 ______[答案] 1. (1)E·coli DNA连接酶,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端; (2)T4DNA连接酶:来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低. (3)热稳定的DNA连接酶(thermostableDNAligase),是从嗜热高温放线菌(...

上英骆2451DNA连接酶能不能连DNA单链 -
严录裴17568309907 ______ 1:结论:DNA连接酶主要用于基因工程,将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合,故也称“基因针线”.只要是DNA就可以连接,无论单链双链. 2 : 延伸:DNA连接酶也称DNA黏合酶,在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色,那就是把两条DNA黏合成一条.无论是双股或是单股DNA的黏合,DNA黏合酶都可以借由形成磷酸双脂键将DNA在3'端的尾端与5'端的前端连在一起.