takara逆转录试剂盒

韦耍严4414MicroRNA逆转录CDNA -
符景良18997155949 ______ 根据你的反转录引物而定. ①如果是普遍反转录引物,则不需要,也就是反转录用一种引物将RNA全部反转成cDNA 然后定量的时候再使用miRNA和对应的普通基因各自的定量引物. ②若使用的是特异性反转录引物 则需要分开反转录,前面的buffer、酶等能混合,最后要分开,加入各自对应的反转录引物. 无论是普遍反转录还是特异性反转录,均可进行后续的定量.貌似特异性引物更精确.

韦耍严4414PCR 实验时逆转录时间少了10分钟会有什么影响 -
符景良18997155949 ______ 得看你是用了什么牌子的反转录的盒子,宝生物的反转录盒子上面说反转录15分钟,不过我们实际操作时就用30分钟,15分钟是底线,所以在特定情况下少个10min没有问题.

韦耍严4414哪里有合成cDNA第二链的试剂盒 -
符景良18997155949 ______ 绝大多数构建cDNA文库的试剂盒都可以实现这个功能

韦耍严4414为什么不用mRNA作为实时荧光定量pcr的模板 -
符景良18997155949 ______ RNA分子怎么能作为PCR模板呢?PCR的酶是DNA聚合酶,需要用DNA为模板!因此需要mRNA逆转录为cDNA,再以cDNA为模板才能进行PCR反应.

韦耍严4414如何克隆出全长基因 -
符景良18997155949 ______ 如何克隆出全长基因 百度搜索NCBI gene,然后将你想查找的基因名称输入,搜索,在接下来出现的表格中选择你要查找基因(主要是为了选择物种),然后在接下来的页面找到基因的各种亚型对应的mRNA序列编号,点进去,在一长串信息中...

韦耍严4414RNA用反转录试剂盒进行反转录时,一定要知道RNA的含量吗? -
符景良18997155949 ______ 询问卖试剂盒的公司 效果比较好.其次是查文献和上论坛提问 同种材料 同种试剂盒 别人做过的 可比性较高. 如果是直接说明针对某种样品 说明了取多大样品量的 往往就是取样了一路按说明做.成功与否与样品本身和试剂盒质量有关. 如果是已经提了RNA的,只反转录 若试剂盒上说明了可收拾的模板的量的范围的 取其内的一个值 除以浓度( 溶解提取的RNA后 比色法测定 用核酸蛋白微量测定仪 或者紫外分光光度计 记录od值 换算出以微克每毫升表示的浓度值 这一步也得到衡量提取物的品质的od值比 一般要求在一个范围之中 才认为后续使用比较保险 说不定还需纯化或 直接要重提以保质保量的) 计算好取样的体积 取了上样 使用试剂盒转录.

韦耍严4414在RNA复制和转录的过程中引物分别是什么? -
符景良18997155949 ______ RNA引物 是一小段单链DNA或RNA,作为 DNA复制的起始点,存在于自然中生物的DNA复制!

韦耍严4414要做全转录组需要多少量的rna -
符景良18997155949 ______ DNA的量≥20μl,浓度≥50ng/μl,每个样最好做三个重复. 测序策略:PE100或PE125 建议数据量: 真核生物: 一般测序:5~6Gb 深度测序:10Gb 原核生物: 一般测序:1Gb 深度测序:5~10Gb

韦耍严4414求助关于microRNA的RT - PCR和qPCR试剂盒的问题 -
符景良18997155949 ______ 不知道你引物设计好了没?如果引物已经有的话,试剂盒就容易解决.不过还要看你得实验目的:1.如果只是简单的把2500BP的片段扩增出来,普通的PCR polymerase就可以了,takara的60多元一支.2.但是普通的酶2500BP的有可能扩增不出...

韦耍严4414你好,我想问你在RT反应做完之后,要做PCR反应了,那还用向反应体系中加dNTP,Taq,还有PCR Buffer等等吗 -
符景良18997155949 ______ 做完反转录的得到第一条cDNA链,之后拿这个cDNA去做常规PCR那是肯定要加这些底物的啦,引物也是要加的.但是如果你设计一个一步法Onestep的(有专门的试剂盒,可以去takara等公司找),可以在同一管子里面一口气完成反转录和后续PCR的工作.