taqman探针长度
逯迹严2672Taqman探针是DNA还是RNA? -
王肺尝19615651345 ______ 是RNA探针.TaqMan 荧光探针是一种寡核苷酸探针,荧光基团连接在探针的5'末端,而淬灭剂则在3'末端.PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步.常用的荧光基团是FAM,TET,VIC,HEX. 而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的首选技术平台.
逯迹严2672定量PCR法中,Taqman探针法需要做溶解曲线吗?为什么? -
王肺尝19615651345 ______ 正常情况下是不需要的,溶解曲线是在SYBR Green法中利用染料在DNA解链时释放不发射荧光,而在DNA双链时与其结合发射荧光的原理制作溶解曲线的,而Taqman探针在PCR反应时其寡核苷酸链由于被DNA聚合酶的外切酶活性给切断,所以不能重新再结合故不能形成探针,所以不需要做溶解曲线.再一个,溶解曲线只是为反应体系中判断是否有非特异性扩增提供一个侧面的依据,适用于染料法.而探针法的特异性很高,从这方面来看也是不需要的.
逯迹严2672FRET引物是什么 -
王肺尝19615651345 ______[答案] Taqman探针法的出现是定量PCR技术的重要里程碑,之后在此基础上发展出了杂交探针法,以及荧光引物法,是对探针法的不断改进和简化.如果希望全面掌握定量PCR技术的研究人员就不能错过这些定量检测技术. 要提到荧光探针或者荧光引物,...
逯迹严2672卡替扩增了看哪个指标
王肺尝19615651345 ______ 1、凝胶电泳指标:扩增反应完成后,通过凝胶电泳可以可视化扩增产物.在凝胶电... 3、TaqMan探针指标:TaqMan探针是一种特殊设计的荧光探针,它含有一个荧光染料...
逯迹严2672...特有的化学成分是___.(2)加入到PCR反应体系的物质,除图中所示引物、酶、模板DNA外,还应包括Mg2+、扩增缓冲液和___.(3)根据TaqMan探针... -
王肺尝19615651345 ______[答案] (1)分析图解,Taq Man探针中含有碱基U,说明该探针为单链RNA,而质粒为小型环状DNA,因此与质粒相比,Taq Man探针中除荧光基团、淬灭剂外,特有的化学成分是核糖和尿嘧啶.(2)PCR技术的原理是DNA的双...
逯迹严2672医学常识中TaqMan技术的基本原理是什么?医学常识中TaqMa
王肺尝19615651345 ______ TaqMan技术的基本原理是,针对PCR特异扩增的靶DNA序列,设计一个特异的双荧光标记的寡核苷酸探针.探针5′端标记的是报告荧光基团,3′端标记淬灭荧光基团.前者的发射光谱可被后者淬灭.因此,当它们共处于一寡核苷酸探针的两端时,由于距离较近,就会发生荧光能量转移,淬灭基团会吸收报告基团的激发荧光.而在PCR循环周期中引物延伸时,与靶DNA杂交的上述荧光标记探针,就会被Taq DNA聚和酶的5′- 3′的外切酶活性裂解,使报告荧光释放出来,此时,荧光检测仪器就能检测到荧光,仪器在整个扩增过程对产生的荧光实时监测,样本中模板的原始数量与当荧光强度超出选定阈值的循环数(Ct)成反比,从而可以根据原始模板与Ct值的这种关系进行定量测定.
逯迹严2672TaqMan探针PCR中,探针和靶基因有多少碱基配对,才能实现有效扩增. -
王肺尝19615651345 ______[答案] TAQMAN一般25-35个碱基吧,最好和模板完全匹配,结合会更好,当然,有一两个碱基不配对也不会影响扩增曲线.MGB是来进行检测SNP位点的吧,一般将SNP位点设置在探针3·末端倒数几个碱基处,可以有效区分.
逯迹严2672探针中的MGB是什么意思,是什么的缩写?Taqman是什么意思,是什么的缩写呢? -
王肺尝19615651345 ______[答案] MGB 的意思是小沟结合,全称是 Minor Groove Binder.Taqman就是一个商标,不是缩写,就是全称,这两个都是用来描述荧光定量PCR中使用的探针.Taqman探针两端分别带有荧光基团和荧光淬灭基团,在正常状态下,探针上的荧光被...
逯迹严2672PCR有全定量和半定量之分吗?二者区别是什么? -
王肺尝19615651345 ______[答案] 有,基本是半定量.我们平时做的RT-PCR,可以说是半定量的,还有现在比较流行的real time PCR基本可以说是定量的,... 是前定量,是检测没一个循环的量故名的来的.一般都是SYBR染色,再准确点的是taqman探针.具体你可以查一下.