rt-pcr实验结果分析

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rt-pcr实验结果分析

来源：baiyundou.net 日期：2024-09-25

本文转自：人民日报客户端

琼达卓嘎

近日，西藏高原医学研究所PCR实验室与西藏自治区人民医院病理科共同完成RT-PCR预实验和甲状腺肿瘤BRAF分子诊断。这标志着该院病理分子检测能力迈上分子诊断的新台阶，将进一步为肿瘤诊断，临床分级及预后，靶向药物精准治疗指导提供更坚实的保障。

分子诊断是当代医学发展的前沿领域，而PCR实验室（基因扩增检验实验室）则是开展分子诊断的重要基础设施。西藏自治区人民医院PCR实验室拥有罗氏COBAS 4800全自动核酸提取与荧光定量PCR系统等一批先进设备，能够保证实验的准确性和质量控制。随着PCR实验室通过技术审核，PCR技术的应用将推动遗传病基因诊断、肿瘤相关突变分析、个性化治疗、个性化用药、疾病预防等方面的进一步发展。

据介绍，BRAF为原癌基因，位于7q34染色体上，该基因的V600E（T1799A）点突变与多种肿瘤的发生有关，最常见于甲状腺乳头状癌和皮肤黑色素瘤，也见于结直肠癌、卵巢癌、乳腺癌和肺癌。乳头状癌约占所有甲状腺癌的85%以上。2023年7月，西藏自治区人民医院病理科已经开展的甲状腺乳头状癌B-raf检测。此外，检测BRAF V600E突变还具有提高诊断准确率、影响手术方案制定与碘-131治疗前评估、诊断毛细胞白血病，指导恶性黑色素瘤的靶向治疗，判断结直肠癌等恶性肿瘤的预后等重要临床意义。

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富鲁儿2259rt - pcr的值为什么意思 -
韩娅沈13155632429 ______ 阈值指指数增长期荧光信号的临界值,一般PCR仪会自动给出阈值,而CT指就是扩增曲线达到阈值时的循环圈数.

富鲁儿2259RT - PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR... -
韩娅沈13155632429 ______[答案] 1.我觉得这个浓度的引物是偏高的,我50ul体系用这个可以p得很清晰了,不过引物只要设计得好引物二聚体不神马的我觉得... 条件是摸索出来的嘛. 最后总结:我觉得引物第一,模板第二,其他神马的只要按PCR的规则随便都可以做出来,做得好不...

富鲁儿2259论述RT - PCR检测基因表达的实验步骤及如何判断并消除DNA污染所造成的影响. -
韩娅沈13155632429 ______ RT-PCR实验,主要分为3步: 1. total RNA的提取 2. mRNA的反转录 3. 荧光定量PCR 消除DNA污染: 1. 按照说明书加入足量的Trizol,细胞过多会引起DNA污染. 2. 现在已经有去除基因组污染的反转录试剂盒,已经在很多实验室常用.你可以尝试一下.

富鲁儿2259干细胞是如何跟具需要分化
韩娅沈13155632429 ______ 骨髓干细胞可分化为精原干细胞最近有研究显示,在组织中和体外培养中,体干细胞... 并通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化分析证实,这些分化的细胞表达...

富鲁儿2259请问提完RNA后,RT - PCR的具体步骤是什么
韩娅沈13155632429 ______ 在总RNA含量中rRNA占最多,约80%.完整的总RNA样品应呈现出三条条带,分别为28S rRNA、18S rRNA、5S rRNA.其中28S rRNA条带的亮度应约为18S rRNA条带亮度的2倍,这表明RNA样品比较完整,基本无降解.如果两条带的亮度反...

富鲁儿2259RNA干扰的RNA干扰主体实验 -
韩娅沈13155632429 ______ siRNA表达载体构建好后,即可进行RNA干扰主体实验.RNA干扰主体实验的重点在于: 按照nature的标准,一个严格的RNAi介导knockdown实验要有6个对照:⒈转染试剂对照(监控转染及培养条件对结果的影响);⒉nonsense siRNA对照...

富鲁儿2259RT - PCR实验为什么RT只加反义引物PCR要加正义引物和反义引物 -
韩娅沈13155632429 ______[答案] 因为RT-PCR的模版是单链的RNA,一种引物就够了,而常规PCR的引物是双链DNA,需要上下游引物从两端同时扩增.

富鲁儿2259trizol法提取rna如何去除dna
韩娅沈13155632429 ______ trizol法提取rna如何去除dna1,裂解组织或者细胞使用的TRIzol量偏少;2,使用的组织材料中含有大量的有机溶剂(如:乙醇/异丙醇等)、高纯度的Buffer、碱性溶剂等;3,如果提取的RNA中含有DNA时,也可以使用DNaseI进行DNA消化.这个如果你做反转录的话,只能是用PCR检测了.电泳基本检测不出来.象现在的试剂盒或者TRIZOL提的RNA,除质量太差,一般含基因组很少.如果RT-PCR发现结果不对,可以用那种不含RNA酶的DNA酶处理一下.如果引物能避开的话,有点DNA也没关系.

富鲁儿2259如何进行CML治疗的分子学疗效评判?
韩娅沈13155632429 ______ 分子学疗效的评价最好是根据国际标准值(international scale, IS),以BCR-ABL转... 分子学水平用实时定量RT-PCR方法分析,可以用外周血和骨髓标本.一般认为,内参...

富鲁儿2259请问PCR与RT?请问PCR与RT - PCR的区别,哪个可用来检测
韩娅沈13155632429 ______ 1. 酶不同: PCR中,聚合酶是以DNA为模板的DNA聚合酶. RT-PCR中,逆转录酶是以RNA为模板的DNA聚合酶. 2.缓冲体系不同: 由于聚合酶不同,两者相应的反...

（编辑：自媒体）