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rt-pcr实验报告

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-25

本文转自:人民日报客户端

琼达卓嘎

近日,西藏高原医学研究所PCR实验室与西藏自治区人民医院病理科共同完成RT-PCR预实验和甲状腺肿瘤BRAF分子诊断。这标志着该院病理分子检测能力迈上分子诊断的新台阶,将进一步为肿瘤诊断,临床分级及预后,靶向药物精准治疗指导提供更坚实的保障。

分子诊断是当代医学发展的前沿领域,而PCR实验室(基因扩增检验实验室)则是开展分子诊断的重要基础设施。西藏自治区人民医院PCR实验室拥有罗氏COBAS 4800全自动核酸提取与荧光定量PCR系统等一批先进设备,能够保证实验的准确性和质量控制。随着PCR实验室通过技术审核,PCR技术的应用将推动遗传病基因诊断、肿瘤相关突变分析、个性化治疗、个性化用药、疾病预防等方面的进一步发展。

据介绍,BRAF为原癌基因,位于7q34染色体上,该基因的V600E(T1799A)点突变与多种肿瘤的发生有关,最常见于甲状腺乳头状癌和皮肤黑色素瘤,也见于结直肠癌、卵巢癌、乳腺癌和肺癌。乳头状癌约占所有甲状腺癌的85%以上。2023年7月,西藏自治区人民医院病理科已经开展的甲状腺乳头状癌B-raf检测。此外,检测BRAF V600E突变还具有提高诊断准确率、影响手术方案制定与碘-131治疗前评估、诊断毛细胞白血病,指导恶性黑色素瘤的靶向治疗,判断结直肠癌等恶性肿瘤的预后等重要临床意义。

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郑骅容4100rt - pcr产物做测序结果有双峰,这个结果就完全不能用了吗?
李蚂品18398946361 ______ 要看你出现的双峰是个别碱基还是所有碱基,如果是个别碱基,那么也有可能是基因多态性,可能还有重大发现呢.如果是测序结果开始没有问题,后面出现问题,有可能是测序本身的问题,再试试看.如果所有位置都有双峰,那问题比较倾向于实验本身的问题,还要看你实验目的是什么:如果RT-PCR结果是用来分析基因的表达,那么两种不同片段都被计算在表达量上了,因此就彻底没有什么用了,重新开始吧.如果你是想克隆一个基因或者一个基因片段,那么没有关系,把RT-PCR扩增的片断纯化后装到任何一个载体里面,转化大肠杆菌,获得阳性克隆.按照概率,其中一部分应该是你需要的目的基因,酶切后进行测序鉴定,找出你需要的克隆就可以了.

郑骅容4100什么是RT - PCR、Real - time PCR及其应用 -
李蚂品18398946361 ______ RT-PCR是反转录PCR,是将提取的mRNA逆转录为cDNA后进行PCR的实验.可定性或半定量mRNA的量. Real time PCR是实时定量PCR,可以精确测定起始模板的量.用于定量测定.

郑骅容4100RTPCR的实验步骤是怎样的呢?
李蚂品18398946361 ______ RTPCR的关键步骤是在RNA的反转录,要求RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质

郑骅容4100RT PCR实验 结果出现非特异性扩增 图像如果显示?它的原因和图像出现拖尾的原因一样吗? -
李蚂品18398946361 ______ 当然是非特异性条带或拖尾. 主要原因是引物的特异不好或扩增条件不好. 需重新设计特异性更强的引物和优化PCR扩增条件.

郑骅容4100如何做RT - PCR实验 -
李蚂品18398946361 ______[答案] RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术.首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段.RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RN...

郑骅容4100荧光定量PCR的前试验准备及流程首先是获取菌体,再提总RNA,然后分离mRNA,之后进行RT - PCR,还是可以直接进行荧光定量PCR呢? -
李蚂品18398946361 ______[答案] 首先是获取菌体,再提总RNA,不用再分离mRNA,直接做反转录RT-PCR,得到cDNA后直接进行荧光定量PCR. 得到的得到cDNA可以保存的时间比较长.这样荧光定量PCR就可以集中一起做.

郑骅容4100干细胞是如何跟具需要分化
李蚂品18398946361 ______ 骨髓干细胞可分化为精原干细胞 最近有研究显示,在组织中和体外培养中,体干细胞... 并通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化分析证实,这些分化的细胞表达...

郑骅容4100从真核生物中获取一已知氨基酸序列的蛋白水解酶基因的试验方案 -
李蚂品18398946361 ______ 已知氨基酸序列,可以反向推出mRNA编码序列(密码子会有好几种情况的) 只要知道首尾10个氨基酸(包括起始密码和终止子),就可以推出个30个碱基对.足够设计PCR产物了,就是要按照不同密码子的组合多设计几对.剩下的事情就是做RT-PCR,得到产物后克隆,测序就可以得到基因了

郑骅容4100重症急性呼吸综合征如何检查?
李蚂品18398946361 ______ 1.血常规病程初期到中期白细胞计数通常正常或下降,淋巴细胞则常见减少,部分病... 4.分子生物学检测以反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,检查患者血液、呼吸道分泌...

郑骅容4100简述庚型肝炎病毒与输血的研究概况?简述庚型肝炎病毒与输血的研究
李蚂品18398946361 ______ 庚型肝炎病毒(HGV)是1995年由美国学者发现.其研究概况是: ①生物性状 HGV... ③实验室诊断用逆转录-聚合酶链反应 (RT-PCR)检测血浆中的HGV-RNA;用...

(编辑:自媒体)
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