rt-pcr步骤及原理

麻依善4245我想问RT - PCR原理及操作是什么
陆谦泽17578828072 ______ 不晓得你说的是RT-PCR(reverse transcription PCR)呢,还是实时PCR(real-time PCR).如果是反转录的话,步骤如下: 1.电泳定量RNA或直接测定RNA浓度. 2.反转录体系:(20 μl) RNA+DEPC 水: 11μl, RNA量1-5μg Oligo dT: 1μl 5X ...

麻依善4245逆转录PCR的介绍 -
陆谦泽17578828072 ______ 逆转录PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形.在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增.

麻依善4245“RT - PCR扩增目的基因cDNA”需要注意的事项有哪些? -
陆谦泽17578828072 ______ RT-PCR 是将 RNA 的反转录(RT)和 cDNA 的聚合酶链式扩增(PCR)相结 合的技术.首先经反转录酶的作用从 RNA 合成 cDNA,再以 cDNA 为模板, 扩增合成目的片段.RT-PCR 技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基 因表达水平...

麻依善4245pcr技术扩增 -
陆谦泽17578828072 ______ PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95度时解旋,55度时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至72度左右DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链.由PCR技术制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能...

麻依善4245RT - PCR一步法与两步法有什么不同? -
陆谦泽17578828072 ______ 然而一步法RT-PCR具有其他优点.一步法RT-PCR在处理大量样品时易于操作,有助于减少残余污 染,因为在cDNA合成和扩增之间不需要打开管盖.一步法可以得到更高的灵敏度,最低可以达到0.1pg总RNA,这是因为整个cDNA样品都被扩增.

麻依善4245请问提完RNA后,RT - PCR的具体步骤是什么
陆谦泽17578828072 ______ 在总RNA含量中rRNA占最多,约80%.完整的总RNA样品应呈现出三条条带,分别为28S rRNA、18S rRNA、5S rRNA.其中28S rRNA条带的亮度应约为18S rRNA条带亮度的2倍,这表明RNA样品比较完整,基本无降解.如果两条带的亮度反...

麻依善4245禽流感的实验室诊断方法有哪些?
陆谦泽17578828072 ______ 由于该病的症状变化较大且无典型性,所以确诊需要实验室方 法进行,诊断方法主要... 其中,依据其原理和技术特点的差异,RT-PCR技术又分为常规、巢式、荧光、多元...

麻依善4245随机引物 之RT - PCR急急急急急!!!!! -
陆谦泽17578828072 ______ 就是使用许多随机的碱基组合的引物(随机组合丰富),一般6到8个碱基,许多随机引物组成的一套引物组,由于mRNA相对较长,随即引物与它结合的位点较多,从而很快反转录形成cDNA单链.

麻依善4245什么是RT - PCR? -
陆谦泽17578828072 ______ RT-PCR简介 RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术.首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段.RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达...

麻依善4245艾滋病检测的生物学方法有哪些?
陆谦泽17578828072 ______ 随着生物技术的发展,核酸检测得到了人们越来越多的重视,它可直接检查HⅣRNA... 多聚酶链反应检测法PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖...