rt-pcr一步法

敖全奋3324rt pcr的扩增检测需要首先经过什么过程后才能进行pcr循环? -
齐贪汤17219904151 ______ RT-PCR 称逆转录聚合酶链式反应 1、从RNA(或mRNA)反转录合成cDNA第一链: 2、于95℃加热5~10min,灭活反转录酶,使RNA—cDNA杂交体变性,然后迅速冰浴冷却. 扩展资料 影响因素 RT-PCR反应受多个因素影响,如硫酸镁的浓...

敖全奋3324PT - PCR操作流程 -
齐贪汤17219904151 ______ 是RT-PCR啊. 一、实验器具与材料: 1、移液枪:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl 2、吸头:1ml、200μl、20μl 3、匀浆管:5ml 4、吸头台:放置1ml吸头的一个,放置20μl吸头的一个 5、EP管:1.5ml、0.2ml、100μl 6、试剂瓶:2个60ml的棕色...

敖全奋3324如何做RT - PCR实验 -
齐贪汤17219904151 ______[答案] RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术.首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段.RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RN...

敖全奋3324我想问RT - PCR原理及操作是什么
齐贪汤17219904151 ______ 不晓得你说的是RT-PCR(reverse transcription PCR)呢,还是实时PCR(real-time PCR).如果是反转录的话,步骤如下: 1.电泳定量RNA或直接测定RNA浓度. 2.反转录体系:(20 μl) RNA+DEPC 水: 11μl, RNA量1-5μg Oligo dT: 1μl 5X ...

敖全奋3324请问提完RNA后,RT - PCR的具体步骤是什么
齐贪汤17219904151 ______ 在总RNA含量中rRNA占最多,约80%.完整的总RNA样品应呈现出三条条带,分别为28S rRNA、18S rRNA、5S rRNA.其中28S rRNA条带的亮度应约为18S rRNA条带亮度的2倍,这表明RNA样品比较完整,基本无降解.如果两条带的亮度反...

敖全奋3324 H7N9型禽流感是全球首次发现的新亚型RNA流感病毒,目前最为快速有效的检测手段是RT - PCR核酸检测.RT - PCR的过程包括反转录作用从RNA合成 ... -
齐贪汤17219904151 ______[答案] (9分)(1)DNA复制 引物与模板链互补配对(2)逆转录酶 Taq酶 耐高温 不能从头合成DNA,只能从3'端延伸DNA链(3)引物Ⅰ和引物Ⅱ

敖全奋3324反向PCR怎么做 -
齐贪汤17219904151 ______ 反向pcr(inverse pcr)反向pcr是一种多聚合酶链式反应(pcr)应用的方法,可使已知序列的核心区边侧的未知rma成几何级数扩增.用适当的限制性内切裂解含核心区的rma,以产生适合于pcr扩增大小的片段,然后片段的末端再连接形成环状分子.pcr的引物同源于环上核心区的末端序列,但其方向可使链的延长经过环上的未知区而不是分开引物的核心区.这种反向pcr方法可用于扩增本来就在核心区旁边的序.

敖全奋3324RT - PCR数据分析 -
齐贪汤17219904151 ______ 需要样本间平行比较.目的基因/GAPDH比值越大,说明目的基因表达量越高.比如1号样本目的基因/GAPDH比值等于0.5;2号样本目的基因/GAPDH比值等于0.8;那就说明2号样本中目的基因的表达量比1号样本高.

敖全奋3324实时荧光定量PCR,是一步法好还是两步发好 -
齐贪汤17219904151 ______ 一步法从方便性上来说肯定是更方便的,但是有时候一步法往往达不到两步法那么好的效果,所以具体还是看你的需求.