一瓶细胞能接几个96孔板
图源Swissbiotech
钛媒体APP注：瑞士连续12年全球创新指数竞争力排名第一，是全球重要的创新策源地，也是中国首个创新战略伙伴关系国，在创新发展和科技金融领域与中国具有极佳互补性。
由Venturelab主办的“瑞士创新100强”，汇聚了最佳“瑞士制造”的初创及成长期科技创新企业，是瑞士最具国际影响力的创新生态标杆。自2011年以来，该榜单每年在瑞士全国范围内评选出100家最具开创性和市场前景的瑞士创新企业和25家最具独角兽潜力的瑞士成长期企业，覆盖生命科学、工程机械、机器人、信息通信、低碳科技、食品科技等领域，今年更是新上榜了41家企业。
为了全方位展示和介绍瑞士最前沿的创新科技，钛媒体APP与Venturelab的中国授权合作方以明科技（InsightTech），合作推出《瑞士创新100强》专题，全面展示瑞士先锋科创生态的全景。
本文为专栏第55期，介绍的SEED Biosciences是2023年《瑞士创新100强》上榜企业，其致力于研发单细胞分离自动移液器。
瑞士生物科技公司SEED Biosciences（以下简称SEED）成立于2018年，该公司开发了一款用于分离单个细胞的自动移液器。该移液器的专利传感吸头基于阻抗原理设计，能快速、轻柔地分离单个细胞，并且感应和记录流过吸头尖端孔的每一个细胞的信息，以即时追溯细胞的单克隆性。
SEED 是瑞士洛桑联邦理工学院（EPFL）的衍生公司，由David Bonzon博士和Georges Muller博士联合创立，二人在博士期间就开发出了自动移液器的第一个产品原型。
图源SEED Biosciences官网
单细胞分离是生物制剂、癌症诊断、干细胞治疗和个性化医疗等许多生物过程工程的关键步骤。对于细胞系开发而言，准确地分离单个细胞并提供可追溯的单克隆性是成功的核心。现有的单细胞分离方法，如有限稀释法等，可能会导致结果的高变异性,且有限稀释实现单细胞分离的成功率仅为22%；而为了追溯细胞单克隆性，实验人员可能还要花费长达50周的时间进行单克隆性验证。
图源SEED Biosciences官网
SEED开发的单细胞自动移液器配有基于阻抗分离技术的专利吸头，能自动、快速、轻柔地分离单个细胞，并且感应和记录流过吸头尖端孔的每一个细胞的信息，实现对细胞单克隆性的即时追溯。
阻抗原理是一种用于测量或控制系统的原理，可通过传感器来测量和控制压力和温度等。SEED自动移液器基于抗阻的专利吸头能以小于0.2 psi的压力处理细胞，保护细胞的完整性和活力。SEED自动移液器就像人手一样轻柔，但比手动效率更高，能在10分钟内将单细胞吸取到96孔板中，在一小时内处理500个细胞。与有限稀释相比，SEED自动移液器的速度快三倍，成本只是其10%。
SEED自动移液器在每个细胞穿过吸头尖端时都会触发独特的电信号，形成峰值并立即记录下来，可即时追溯细胞的单克隆性。电信号的峰值数量代表每个孔内的细胞数量，几个峰值就是几个细胞，而非常小的峰值则代表存在一些碎屑或其他微小的颗粒。在完成移液后，SEED会详细检查电信号，自动标注出不符合标准的孔板信息，帮助研究人员追溯每个孔内细胞的单克隆性。
SEED自动移液器的设计紧凑，采用台式尺寸，能直接放在实验台上并与无菌培养罩集成。其在使用前无需调试或校准设备，用户使用界面也非常简单直观，十分适合实验研究使用。应用场景方面，SEED自动移液器定位于细胞系开发、CRISPR介导的基因编辑、单克隆抗体筛选以及稀有细胞分离。
2020年，SEED完成了100万瑞士法郎的A轮融资，用于扩大科研投入以及移液器的生产。2022年，SEED获得了40万瑞士法郎的Tech Growth贷款，用于推进公司在美国的销售网络发展。2023年，SEED与业界领先的生命科学高性能解决方案供应商Molecular Devices达成合作，后者成为SEED在美国和亚洲的独家商业供应商。通过此次合作，SEED在北美和亚太地区主要市场的销售额预计将增加两倍。
2023年《瑞士创新100强》中文版由以明科技（Insight Tech）荣誉发布。以明科技是《瑞士创新100强》的中国授权合作方，负责《瑞士创新100强》在中国的运营推广并协助榜单项目对华商业合作。作为中欧（瑞士）科技创新投资与产业化运营商，以明科技为瑞士创新和中国产业的双向合作提供投融资和商业拓展服务并开展股权投资业务。
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庄饰雯2187如何通过共聚焦显微镜观察96孔板 -
鲁命览14797007985 ______ 一般共聚焦显微镜专用物镜的焦距都很短,只有10倍物镜的焦距可以直接透过96孔板的底部看到细胞.如果你想用更高倍数的物镜观察,必须使用特殊的96孔板,或者特殊的长工作距离物镜.我见别人用过一种底部是0.17mm厚度玻璃的96孔板,这个可以向几个细胞培养耗材生产商问问,长工作距离的物镜可以向共聚焦显微镜的生产商问,一般这个就比较贵了.
庄饰雯2187细胞培养时怎样调整细胞浓度? -
鲁命览14797007985 ______ 细胞计数呗.根据所计数量和培养液体积确定接种的数量.铺板或者是传代都有大致的细胞数量的范围,根据这个确定培养液用量就是了.
庄饰雯218796孔板的使用注意事项 -
鲁命览14797007985 ______ 和普通细胞培养一样,使用96孔板请注意你的细胞、培养基、用具无菌,尤其注意操作时气流方向,可能带菌的物品、手不要在上风处移动.
庄饰雯218796孔板周围孔细胞死亡,但是中间的孔细胞长的还可以,很奇怪,为什么? -
鲁命览14797007985 ______ 也有可能是因为脱水渗透压改变而造成的死亡.因为板的外围孔较容易蒸发失水. 培养细胞要求板既能透气,又不能被水分迅速蒸发流失.如果板的质量问题造成培养液内水分蒸发掉较多,则培养液会变咸,细胞失水死亡.如果还是用同样的板,可以试试外围不种细胞,每孔加点无菌水,也有助于保护中间孔的细胞. 另外也有可能是楼主加的培养液本身量不够.我都用两到三百微升,楼主如果用比较少,可以试试加多些.
庄饰雯2187MTT法细胞活力检测贴壁细胞活力时,如何确定细胞接种到96孔板的时间? -
鲁命览14797007985 ______[答案] 博凌科为贴壁细胞一般在实验前1-2日接入96孔板.太晚,细胞在传代后有一个16小时左右的停滞期,此时代谢变慢,增殖缓慢,此时的MTT数值太低;太早,实验期间,细胞生长过头,此时有死亡和凋亡的细胞,实验时本底又过高,应该寻求的效果...
庄饰雯218796孔板如何让其细胞均匀我种96孔板每次都不均匀,有的细胞孔多 有的少,我用15ml离心管稀释后种,每种4个孔就把盖子盖上颠倒几下离心管,可是还不... -
鲁命览14797007985 ______[答案] 博凌科为我做96孔板时,把细胞消化下来后,加好培养基,先接种一个孔,看细胞浓度是否合适,合适的话,在接下面的孔.不过要注意,每接几个孔,就将培养瓶适当的晃晃,以求尽量使细胞均匀分布,在取.不要从头接到尾,手里培养瓶一动不动...
庄饰雯218796孔板培养板能否代替酶标板测吸光度? -
鲁命览14797007985 ______ 博凌科为解答:1.最好是用酶标板,因为96孔板的各孔透光性不一致;2.拆成一条条的方便使用一些.MTT法计数细胞的相对数,可以对96孔板培养的细胞在用药物刺激后的直接计数;也可以把细胞制备成细胞悬液,加到96孔板中,然后加MTT孵育、 计数.所以,如果是前者,必须用培养板;如果是后者,可以用酶标板.平底的,酶标板好一些.
庄饰雯218796孔酶标板可以培养细胞吗? -
鲁命览14797007985 ______ 应该可以.不过细胞培养板表面经过处理,比较亲水,利于细胞贴壁.(当然还有其他的细胞培养板,这里说的是普通的TC处理板)酶标板表面可经过处理变成高结合酶标板,或者不处理就是中结合力酶标板,酶标板分类也很多的,看具体要结合的分子.
庄饰雯2187培养细胞用的96孔板能用于elisa吗 -
鲁命览14797007985 ______ 能用,但是要看你做的需要的是什么,如果是上清液做NO清除率这些能用,如果是需要裂解去除细胞壁这种一般都用6孔板
庄饰雯2187做MTT时,96孔培养板细胞浓度该是多少 -
鲁命览14797007985 ______ 五千到一万即可.望采纳^O^