上下游引物是怎么复制的
叶梁包4459怎么用双突变体确认两个基因的上下游关系 -
郟宇常13124809075 ______ 双突变体(A+B)有着单突变体A的表型的话,那么基因B在上游. 可以好好画画图,记住总开关是下游的.
叶梁包4459DNA引物溶液怎样配置 -
郟宇常13124809075 ______ 合成公司交给你的引物成品一般是会注明有几个OD.正常一管引物干粉都是1个OD,相当于33μg. 因为引物溶液浓度一般要求是10μmol/L,所以首先要计算引物的摩尔数,碱基平均分子量324.5,如果你的引物长度是n,那么引物摩尔数就是33÷n÷324.5. 比如你的引物长度是24个bp,摩尔数就是33÷24÷324.5=4.2nmol,也就是说要加入420μL的双蒸水就能配成10μmol/L的引物溶液. 加入水前记得先要在离心机上把引物管5000转以上转2分钟,把干粉都甩到底部,以免打开的时候飘散.
叶梁包4459当复制几次之后,新和成的链上不是就会没有没有引物结合的位点了 -
郟宇常13124809075 ______ 首先你要明白,DNA合成需要引物3'端的羟基,合成方向是5'-3'.如果非要指明模版链和互补链,那么上游引物是和互补链3'配对,这样合成方向才是5'-3' 而下游引物和模版的3'端互补配对,合成方向5-3' 结果是,一个模版复制出2个子代,引物之间的序列是相同的,半保留复制,母代的DNA双链被分开.理论上类似裂变反应,所以PCR才能在30-40循环后将微量的序列放大百万倍
叶梁包4459PCR技术是将某一DNA片段在实验条件下,合成许许多多相同片段的一种方法, -
郟宇常13124809075 ______ (1)PCR技术能将某一DNA分子进行扩增成许多相同的DNA片段,原因是:①DNA分子具有( 双螺旋 )结构;②DNA复制时遵循( 半保留复制)原则.(2)在实验条件下,DNA分子进行扩增,除了所要扩增的DNA片段外,还需要四种 (dNTP)、(模板)和(引物)(聚合酶等条件.(3)某DNA片段有160个碱基,其中有腺嘌呤35个,若让该DNA分子扩增三次(即复制三次)至少需要腺嘌呤脱氧核苷酸和鸟嘌呤脱氧核苷酸的数目分别是(105)个和(375)个.
叶梁包4459已知引物序列,如何通过primer5.0找到目的基因的长度 -
郟宇常13124809075 ______ 两种方法: 1.用primer: 打开Primer 5 FILE New 然后粘入基因序列 再点Primer 就可以看到S A 点S 再点Edit Primers 然后把你的上游引物序列贴进去 然后点Analyze、Prime、OK这时可以看到上游引物结合的位置 同样的,点S 再点同样的按钮 同样把下游贴进去 就可以看到上下游的位置 两者之间的距离就是你目的基因的长度 2.用NCBI 上的BLAST 打开blast,下方有一个Primer-blast,点开 将自己的基因模板粘到第一个框里 将上下游引物分别粘到第二个框里 点get primer,即可得出结果.
叶梁包4459pcr扩增为什么需要两个引?pcr扩增为什么需要两个引物
郟宇常13124809075 ______ 不会脱落,因为引物的组分就是普通核酸,没必要让它再脱掉.PCR不像在生物体内一样,中没有那种降解酶H.要是有特殊要求的可能要脱.
叶梁包4459什么是上、下游引物,什么是5'端引物和3'端引物?上下游引物是不是相对的?双链DNA的每一条链都有5'和3'端,那5'和3'端引物是怎么区分的? -
郟宇常13124809075 ______[答案] 四种核苷酸或脱氧核苷酸按照一定的排列顺序以3',5'磷酸二酯键(phosphodiester linkage)相连形成的多聚核苷酸链或... DNA双链是反向的,复制时,两股链均作为模板,但新链的合成只能是5'→3' 引物提供3'-OH,与原料dNTP的5'-P形成...
叶梁包4459PCR技术中不是必须要在引物后面形成DNA链么?那不是越来越短么?怎么生成大量DNA链的呢? -
郟宇常13124809075 ______[答案] PCR反应中有两条引物,即5′端引物和3′引物.设计引物时以一条DNA单链为基准(常以信息链为基准),5′端引物与位于待扩增片段5′端上游的一小段DNA序列相同;3′端引物与位于待扩增片段3′端的一小段DNA序列互补. DNA的复制需要RNA引...
叶梁包4459什么是引物? -
郟宇常13124809075 ______ [编辑本段]概念 引物,是一小段单链DNA或RNA,作为DNA复制的起始点,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链,在引物的3′-OH上,核苷酸以二酯链形式进行合成,因此引物的3′-OH,必须是游离...
叶梁包4459PCR怎么获得目的基因 -
郟宇常13124809075 ______ PCR是根据建基互补的原则来进行DNA扩增的.用PCR来获得目的基因,是依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物(即上游引物,下游引物).通过PCR的变性--退火--延伸三个基本反应,在引物区间内的基因就能大量被复制,达到钓取基因...