绝对定量pcr拷贝数计算

屈放侍4745什么是相对定量和绝对定量啊? -
沃堂晶13495849248 ______[答案] 绝对定量的目的是测定目的基因在样本中的分子数目,即通常所说的拷贝数.相对定量的目的是测定目的基因在两个或多个样本中的含量的相对比例,而不需要知道它们在每个样本中的拷贝数.举例来说,如果研究项目中包括处理过的和未经处理的对...

屈放侍4745半定量pcr如何分析基因拷贝数 -
沃堂晶13495849248 ______ 电泳后拍照,用图像分析软件测定条带的亮度,然后与标准参照带的亮度进行比较,推算出待测带的拷贝数.

屈放侍4745real time PCR能测定基因组内某一基因的拷贝数吗 -
沃堂晶13495849248 ______ 这个先要把基因组提取出来,然后把基因组做模板,对那个基因进行RT-PCR,如果所研究的某一基因的所有拷贝数都包含在基因组内的话,那么就可以确定原始的拷贝数,当然需要制作一个标准曲线的,(可以把那段基因当做定量的工具,先要准确定量好,浓度大一点的,就是说先定量一个ng级以上的标准模板,可以用紫外分光光度计或是nanodrop等仪器能够检测出的,然后梯度稀释,这样先制作成一个标准的曲线)这样可以根据RT-PCR的扩增Ct值代入到标准曲线里去求出拷贝数,当然模板要全部包含在基因组内.不知道我说的对不对,也就是你所说的实际上就是检测模板的浓度.

屈放侍4745如何计算出DNA转入的拷贝数?
沃堂晶13495849248 ______ 其原理是将待测的DNA样品固定在固相载体(硝酸纤维膜或尼龙膜)上,与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号,通过检测信号的有无、强弱可以对样品定性、定量,从而计算出转入的拷贝数

屈放侍4745质粒拷贝数我现在计算出制备实时定量PCR标准曲线的质粒浓度为3.028*1011(10的11次方),但是在设置程序时如何换算成:E+? -
沃堂晶13495849248 ______[答案] 3.028*1011(10的11次方)就是3.028E11 E就是10的几次方的意思.

屈放侍4745如何设计绝对定量和相对定量实验 -
沃堂晶13495849248 ______ 看你实验要求,一般实验设计中没必要这么做现在做绝对定量的很少,如果相对定量,只要找好对照基因即可.你可能想检查自己的某个基因A表达是否发生变化了,提取了两个样品的cDNA,这种情况下,无需将两个样品的cDNA调整到相同浓度.而是找一个在两个样品中表达基本认为不变的持家基因B,然后对两个样品中的A和B同时都进行实验.通过检测不同样品中A与B的比值,就可以知道A基因表达是否发生变化了.

屈放侍4745请问基因的拷贝数是怎么定义的,怎么计算啊? -
沃堂晶13495849248 ______[答案] 拷贝数就是指该基因在某一生物群体或个体中存在的个数. 单拷贝就是该基因在基因组中只有一个,多则指有多个,一般来讲研究基因的拷贝数要用southern blot来鉴定

屈放侍4745抗除草剂转基因植株如何确定单拷贝? -
沃堂晶13495849248 ______ qPCR,与标准品进行比较,进行绝对定量,然后就可以计算出在基因组中的拷贝数.

屈放侍4745数字PCR检测方法如何选择? -
沃堂晶13495849248 ______ 数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术.相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量. 在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今,你...

屈放侍4745DNA的浓度怎么换算成拷贝数 -
沃堂晶13495849248 ______[答案] 要看DNA分子的大小. 如HBV-DNA 1pg/ml=283,000copies/ml; 大肠埃希菌DNA的PCR产物其16S rRNA 基因芯片的最小检出量为1 pg,约等于10个拷贝数; .