酶切用到的酶

舒冰向1550限制性内切酶,连接酶等这些酶,他们是怎么来的,是DNA么?还是什么? -
柯贞江18454138586 ______ 首先,不是DNA. 这些酶的本质是蛋白质. 这些酶开始时候都是 从细菌细胞中分离纯化而来,后来多通过基因工程得来.即把这些酶的基因(DNA片段)转化进入某种细菌(一般是大肠杆菌),再通过细菌大量合成,最后再分离纯化得到.

舒冰向1550DNA在用酶切割时需要的酶切位点怎么?DNA在用酶切割时需要的酶
柯贞江18454138586 ______ 是有可能的.所以在设计克隆和酶切以前都要考虑到这种情况. 在克隆的时候,基因两端加的限制性内切酶的位点必须是基因中间序列所没有的.这样克隆完成后再酶切,就没有这个顾虑了. 有些特例,就是无论怎么设计,基因序列当中都有酶切位点,这是在做酶切的时候,就进行不完全酶切(酶的量减少,反应时间缩短).这样,有一部分中间位点就不会被切断,基因全长得以保留.

舒冰向1550为什么使用限制性内切核酸酶对基因组dna 进行部分酶切 -
柯贞江18454138586 ______ 基因工程操作中涉及一系列相互关联的酶促反应.已经知道有许多重要的核酸酶,如限制性内切核酸酶、外切核酸酶、dna连接酶、DNA聚合酶、反转录酶、DNA及RNA的修饰酶等,在基因工程的操作中有着广泛的用途. 1.限制性内切核酸酶 ...

舒冰向1550酶切实验中是选对甲基化敏感的酶吗 -
柯贞江18454138586 ______ 看你酶切实验的目的,如果是想对检测位点的甲基化水平进行检测,需要选能识别甲基化的酶,否则的话,应该选择对甲基化不敏感的酶.

舒冰向1550我要做pGAPZαA的线性化表达,双酶切用的是Xba Ⅰ和XhoⅠ,应该选择什么样的限制性内切酶啊?请各位指教 -
柯贞江18454138586 ______ 一般来讲,载体的线性化,公司会建议一些酶.选择线性化酶有两个前提:1,这个酶切位点,不能出现在插入片段中,也不能出现在载体的必要的功能片段中.否则就破坏序列的完整性.2,最好只有一个位点,这样对载体的影响最小.其它的,就是从成本,以及实验操作上的考虑了.有高效合适的常用酶,就不要去试那些不常用的特殊酶了.

舒冰向1550限制性核酸内切酶酶切后,再用连接酶连接,同一限制性内切酶酶切位点还能否产生? -
柯贞江18454138586 ______[答案] 如果用同种限制酶来切目的基因和运载体,再用DNA连接酶来接,则切点能恢复.如果用不同限制酶来切,则一般不能恢复.