酶连体系

卞宏晓4289农杆菌转化法的步骤 -
夔雨种18283806186 ______ 转化:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上——进入农杆菌——导入植物细胞——目的基因整合到植物染色体的DNA上——目的基因得以稳定维持和表达1、获取目的基因:用限制性核酸内切酶切割下目的基因.2、基因表达载体的构建:将目的基因...

卞宏晓4289不同的平末端可以用dna连接酶连起来吗 -
夔雨种18283806186 ______ T4噬菌体DNA连接酶 外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子.重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2 、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接...

卞宏晓4289双酶切酶切体系和buffer怎么设计比较合适? -
夔雨种18283806186 ______[答案] 体系不管多大,都有相应的buffer,只要将buffer变为1X工作浓度就行了,两个同时切的话,需要注意酶的量,看单位是多少,一般是1ul的酶切1ug的质粒或者其它DNA序列,尽量酶的体积不能超过体系的10%,因为里面含有甘油,可能会影响酶切效...

卞宏晓4289酶切体系1 酶在十倍以上体积才能发挥作用,问如果是双梅切,a酶用1ul,b酶用2ul,那么反应体系到底是(1+2)*10,还是2*10?2 如果反应总体积是50ul,... -
夔雨种18283806186 ______[答案] 1.是2*10 2.分别是50/10=5,50/5=10,50/2=25. 一般来说几*就是对buffer稀释几倍.

卞宏晓4289用T4连接酶做载体连接为什么一直连不上 -
夔雨种18283806186 ______[答案] 连不上的因素比较多,首先你要先确保载体和基因片段已经用相同的内切酶处理好,然后再看连接体系中你所加的载体的量和基因片段的量是否合理,一般这两者的比例为1:5-1:10之间比较好,还有就是你的连接体系各种成分是否还...

卞宏晓4289要配置多少的酶切体系,载体和插入DNA的量要加多少? -
夔雨种18283806186 ______[答案] 因为内切酶的酶活性单位定义是在50ul反应体系中,最适温度反应1小时能够讲1ugDNA完全酶切的酶量.所以,一般在酶切体系里,DNA的量是可以加到非常大的.因为考虑到后期的纯化后DNA的损失问题,所以推荐酶切体系中的DNA尽量多加一些....

卞宏晓4289载体双酶切后用不用去磷酸化再做连接?酶切体系可以直接用作连接反应吗?用不用纯化?谢谢指点 -
夔雨种18283806186 ______ 不用去磷酸化咯.酶切后一般要跑胶纯化

卞宏晓4289什么是多酶系统? -
夔雨种18283806186 ______ 多酶复合物;多酶复合体;多酶体系;多酶系统;多酶簇;multienzyme;multienzyme cluster;multienzyme system 性质: 亦称多酶复合体,多酶体系,多酶系统,多酶簇.是多种生物催化剂的集合体,即它由几种不同的酶相互嵌合形成一个结构和功能上保持统一的整体,并具有连续催化生理功能上密切相关的一组反应能力的酶集合体.它由给定酶类的一种或多种分子(种)组成,分子量一般都高达几百万以上.例如在酵母及动物组织中的脂肪酸合成中的脂肪酸合成酶复合体和细菌及动物组织中丙酮酸脱氢酶复合体等.转自百度百科

卞宏晓4289急!!!G蛋白偶联受体与酶偶联受体的异同 -
夔雨种18283806186 ______ 细胞表面受体分三大家族: (1)离子通道偶联受体; (2)G蛋白偶联受体; (3)酶连受体. (2)(3)存在于不同组织几乎所有类型的细胞.G蛋白偶联受体是7跨膜受体,受体激活后,需要GTP结合蛋白激活下游的酶,如AC,借助第二信使分子(如cAMP,cGMP,DAG)发挥作用. 酶连受体也是跨膜蛋白,与GPCR的一大不同是其需要2个受体激酶二聚体化,与信号分子结合,从而自身活化,然后再向细胞内传递信号.RTK介导的信号通路还需要Ras蛋白. 大致就这样.要系统整理,需详细研究.GPCR和酶连受体信号途径都是相当大的家族,过程也是比较复杂的.