pcr中经过n个循环后拷贝数

卢泉版2425基因扩增的基因扩增 - PCR技术 -
夏伊霭17644434367 ______ 多聚酶链式反应的原理类似于DNA的天然复制过程.在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,DNA扩增2n倍. 1.变性:加热使模板DNA在高温下(94℃)变性,双链间的氢键断裂而形...

卢泉版2425PCR的原理是什么? -
夏伊霭17644434367 ______ PCR技术基本原理 PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后,使模板...

卢泉版2425PCR循环的过程是怎样的 -
夏伊霭17644434367 ______ 变性:94度下双链DNA解开变单链 退火:单链DNA与引物结合 延伸:两段引物向中间复制链接在一起. 这三个步骤重复30-40次.

卢泉版2425PCR与DNA复制有何异同? -
夏伊霭17644434367 ______ PCR是DNA的体外扩增技术. DNA复制是有生命力的细胞在体内 自我复制的过程 ,属于体内扩增. PCR(聚合酶链式反应)原理 PCR是体外酶促合成特异DNA片段的方法,主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成: 即...

卢泉版2425PCR为什么会出现循环延?PCR为什么会出现循环延迟
夏伊霭17644434367 ______ 这个问题比较好理解,因为在循环结束后,体系中的taq酶可能很多正处于复制状态,如果此时降到室温,将会影响最终产率.所以再留出5分钟,以使正在复制中的taq酶能够复制完全,以合成更多的目的分子. 看最后一个循环: 先95度,dna在高温下变性,解链成单链分子,然后退火,具体温度与所用引物有关,就以55度为例吧. 引物与单链dna模板结合上去,再72度延伸,在taq聚合酶的作用下,引物延伸. 该循环结束. 注意,此时尚有正处于合成过程中的dna链,为了保证充分的得率,所以再增加5分钟,以允许尚处于合成状态的dna分子能够完成整条链的合成. 在rna的逆转录时,也有这样的一个步骤. 用途也是一样的.

卢泉版2425pcr循环过多有什么影响? -
夏伊霭17644434367 ______ PCR敏感性太高,循环过多容易产生假阳性结果,比方说把试剂中原本极其微量的杂质序列片段放大扩增,影响对正常结果的判断.

卢泉版2425模拟PCR的过程,请写出1 - 7个循环,目的片段分别被复制了多少?在第25个循环,目的片段被复制了多少? -
夏伊霭17644434367 ______ 原料:Taq酶、模板、引物、四种脱氧核糖核苷酸. PCR扩增原理是DNA在高温下解旋并在热稳定DNA聚合酶作用下自我复制.所以: 第一次:1*2^1=2 第二次:1*2^2=4 第三次:1*2^3=8 (第n次为2^n个) 第25次:目的基因片段被复制复制了2^25个

卢泉版2425PCR扩增所需的循环数目由什么来决定?
夏伊霭17644434367 ______ (3)PCR扩增所需的循环数目决定于反应体系中起始的模板拷贝数以及引物延伸和扩增的效率.一旦PCR反应进入几何级数的增长期,反应会一直持续下去,直至某一成分成为限制因素.从这一点上来说,扩增产物中绝大多数应该是特异性的扩增产物,而非特异性的扩增产物应该低到难以检测到的程度.用TaqDNA聚合酶(效率为0.7)在一个含有10的5次方个拷贝的靶序列的反应体系中进行30个循环后往往可以做到上述的理想情况.

卢泉版2425...(2) 如把一个用 15 N 标记的某个 DNA 样品,以 14 N 标记的脱氧核苷酸为原料,经过 PCR 仪 5 次循环后,将产生 - ______ - 个 DNA 分子,其中含 14 N 标... -
夏伊霭17644434367 ______[答案] (1) 缓冲 DNA 模板、分别与两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的 DNA 聚合酶 (2)32 100% 30% (3) 脱氧核苷酸的数目、比例和排列顺序的不同 DNA 聚合酶只能特异...

卢泉版2425pcr扩增目的片段时,在第几个循环后才能出现目的片段长度的双链DNA分子? -
夏伊霭17644434367 ______[答案] 第二次 比如目的基因是300bps ,母链DNA2000bps forward primer从母链第25碱基开始由5'-3'开始复制, backward primer从第325由3'-5'开始反向复制. 第一次复制25——2000 和 325——1 两条. 第二次复制以第一次产物为模板可以复制出 25-325 ...