pcr所需dna模板量

竺独矿5126PCR扩增试验中,试分析没有PCR产物的原因?
明汤君19824541708 ______ 扩增不出产物那就根据PCR体系的组分和条件去思考分析.具体如下:1)模板DNA:是否被降解:DNA是不是溶解在1X TE(10 mM Tris-HCl,Hp8.0, 1 mM EDTA)里面...

竺独矿5126基因扩增的基因扩增 - PCR技术 -
明汤君19824541708 ______ 多聚酶链式反应的原理类似于DNA的天然复制过程.在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,DNA扩增2n倍. 1.变性:加热使模板DNA在高温下(94℃)变性,双链间的氢键断裂而形...

竺独矿5126如何稀释DNA模版并进一步进行PCR -
明汤君19824541708 ______ 你可以用水进行1,1:10,1:100稀释,然后用管家基因(如actin)来进行定量PCR,根据溶解曲线和CT值来判断上样的最佳模板浓度.

竺独矿5126PCR和DNA复制的异同点是什么? -
明汤君19824541708 ______ 【相同点】: 1. 都以DNA为模板 2. 都以四种dNTP为底物 3. 都要DNA聚合酶 4.都需要Mg2+ 5. 都需要解开双链为2条单链 6. 都沿着5'-3'方向聚合【不同点】: 1. PCR是DNA复制的体外扩增技术 2. 体内DNA复制半不连续复制,体外PCR连续复...

竺独矿5126基因测序的步骤是什么? -
明汤君19824541708 ______[答案] PCR产物直接测序技术现已成为分子生物学和基因组学研究中的一个重要技术,广泛用于基因突变检测、遗传性疾病诊断、单核苷酸多态性研究、基因组重叠序列群等.与传统克隆测序技术相比较,直接对PCR扩增的DNA进行测序,省去了耗时的克...

竺独矿5126PCR循环的过程是怎样的 -
明汤君19824541708 ______ 变性:94度下双链DNA解开变单链 退火:单链DNA与引物结合 延伸:两段引物向中间复制链接在一起. 这三个步骤重复30-40次.

竺独矿5126胞水平进行WB和RT - PCR所需多少细胞,一般用多大的板子培... -
明汤君19824541708 ______ 胞水平进行WB和RT-PCR所需多少细胞,一般用多大的板子培... : whole blood 全血(即未经任何方式分部分离的血液) Western Blot,“Western免疫印迹法”.是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体...

竺独矿5126PCR扩增1000bp左右的产物反应体系和温度一般怎样设定?
明汤君19824541708 ______ 反应体系要看你引物和模板的量、性状,一般反应总体积为25微升的话,引物各1微升,10*buffer 2.5微升即可,DNA聚合酶参照其说明书加量,一般0.3-0.5微升. 循环参数:94°变性30-45s足够,72°延伸也可设45s-1min,复性温度很关键,要看引物的特性(G+C%、是否容易形成发卡、二聚体等)和特异性(与模板DNA的同源性)等,一般在50°左右. 此外,要根据出带与否以及带的亮度、性状(sharp与否)不断调整退火温度和Mg的浓度.

竺独矿5126PCR反应的引物有何种要求? -
明汤君19824541708 ______ PCR引物设计的11条要求1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计. DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的.在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(...