qpcr模板加多少合适

廖邹图3148提取的DNA模版浓度均低于50ng/ul,做25微升体系的PCR,模版应该加多少微升? -
边韦苏19119503356 ______ 可以稍微大一点,加3ul试一试,不过模板这个要求不太高,关键是你的引物设计的质量还有DNA聚合酶的活性,据说不是有人做过“单分子PCR”吗?

廖邹图3148定量pcr时模板为什么不能加到预混液 -
边韦苏19119503356 ______ 1、大部分实验需要做NTC,所以先将预混液分样到反应管里再加样品2、减少PCR反应前模板和反应液接触时间,结果更准确3、提前将模板加入预混液再分装无法保证每个反应管里的样品浓度平均,误差较大4、很多模板都是用一种反应液,所以为了避免浪费时间;浪费试剂;浪费生命,建议在反应液区先将反应液配好分装,然后到模板区加模板.

廖邹图314896孔板pcr是可以一次做96个样本吗 -
边韦苏19119503356 ______ 如果要求不是特别苛刻的话,可以用分光光度计测定OD值.因为DNA的浓度与260nm处的吸光度成正比,所以只要测定了初始溶液的OD值,按比例加入即可.

廖邹图3148塑胶模具一般顶针与顶针模板有多少间隙与公模仁间隙又是多大. -
边韦苏19119503356 ______ 顶针板加0.5,公模刚好或者大0.02都没事,顶针一般都是减0.03的了

廖邹图3148PCR时为什么要加一对引物,只加一对中的一条会有什么问题 -
边韦苏19119503356 ______ 因为PCR第一步要95°加热使DNA变性得到两条单链作为PCR扩展的模板,模板序列不同,所以PCR时要加一对引物.只加一对中的一条扩展速度只有一半.

廖邹图3148一平米模板要多少铁钉 -
边韦苏19119503356 ______ 一般要:0.6~0.7KG的铁钉就行了.除非加多时要1KG应该足够了.

廖邹图3148为什么QPCR引物设计在跨外显子的接头区 -
边韦苏19119503356 ______ 如果反转录体系里面有基因组残留,而且你的引物没有跨内含子,这样的情况下就很容易造成你的Ct偏小(除了cDNA扩增外,基因组的模板也会作为模板进行扩增,导致模板起始量偏高);cDNA逆转后是切除内含子的,而基因组是存在内含...

廖邹图3148qpcr 5 - fam探针 加多少探针 -
边韦苏19119503356 ______ 探针是电测试的接触媒介,为高端精密型电子五金元器件. 探针是一小段单链DNA或者RNA片段(大约是20到500bp),用于检测与其互补的核酸序列.双链DNA加热变性成为单链,随后用放射性同位素(通常用磷-32)、荧光染料或者酶(如辣根过氧化物酶)标记成为探针.磷-32通常被掺入组成DNA的四种核苷酸之一的磷酸基团中,而荧光染料和酶与核酸序列以共价键相连. 当将探针与样品杂交时,探针和与其互补的核酸(DNA或RNA)序列通过氢键紧密相连,随后,未被杂交的多余探针被洗去.最后,根据探针的标记物种类,可进行放射自显影、荧光发光、酶联化学发光等方法来判断样品中是否,或者何位置含有被测序列(即与探针互补的序列).

廖邹图3148荧光定量pcr,定量时加完所有试剂后板里的体系怎么混匀 -
边韦苏19119503356 ______ 荧光定量pcr操作步骤 荧光定量PCR 实验步骤: 样品RNA的抽提 ①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解. ②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿,盖紧管盖.手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2...

廖邹图3148PCR有引物二聚体能直接纯化然后测序吗 -
边韦苏19119503356 ______ 可以,二聚体是经常有的,只要切胶能分开就行的.