taqman探针荧光定量pcr原理

花追茗2482荧光定量PCR问题 -
管中栋13737966050 ______ 还是可以用的.不过现在SYBR GREEN的方法已经逐渐被淘汰了,建议换用probe-primer的方法.因为SYBR GREEN的结合是非特异性的,越长越容易出现错误.

花追茗2482这个tapman荧光定量pcr的单子什么意思 -
管中栋13737966050 ______ 这是乙肝病毒DNA检测报告,Taqman指的是DNA的检测使用基于探针的实时荧光定量PCR方法,这种方法精确性很高,不会出现非特异性检测. 你的结果Ct值跟病毒DNA的量有一定关系,Ct值越大,病毒DNA量越少.检测结果中<1.0E+03意思是病毒DNA的量少于1000个/毫升,一般病毒DNA量大于1000个/毫升会认为是乙肝阳性. 结论是,该同志是健康的,乙肝病毒阴性.

花追茗2482SNP基因分型的主要方法
管中栋13737966050 ______ 1.TaqMan探针法 针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增.探针的5'-端和3'-端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团.当溶液中存在PCR产物时,该探针与模板退火,即产生了适合...

花追茗2482Taqman探针是DNA还是RNA? -
管中栋13737966050 ______ 是RNA探针.TaqMan 荧光探针是一种寡核苷酸探针,荧光基团连接在探针的5'末端,而淬灭剂则在3'末端.PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步.常用的荧光基团是FAM,TET,VIC,HEX. 而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的首选技术平台.

花追茗2482荧光定量PCR的扩增产物长度为什么不能太长? -
管中栋13737966050 ______[答案] Taqman探针为基础的Real-time PCR以引物和探针序列决定反应的特异性,而通过荧光强度判断探针降解程度,从而推断模板量. 传统PCR通过琼脂糖凝胶电泳判断产物量,达到半定量的目的.由于EB等染色剂与较长片段DNA结合后才能显现可测量...

花追茗2482荧光定量pcr taqman为什么要用两步法 -
管中栋13737966050 ______ 你这个结论并不对.两步法,三步法并没有本质区别,信号的读取都是在每一个延长结束后读取.定量PCR一开始的时候也是三步法的.两步法,是因为设计引物的时候把退火温度设为酶的工作温度,而且定量PCR的产物都很短,需要的时候都短,所以两步法更方便.三步法的话,花的时间长,不利于快速实验.

花追茗2482我需要做荧光定量PCR -
管中栋13737966050 ______ 做RT-PCR的PCR管,要求比普通PCR管更高:可靠的密封性效果,低蒸发,管盖易开合. 薄壁,良好的热传递效率. 管壁均匀光滑,传热精确,低吸附. 材质:医疗级PP原料生产, 热稳定好:加热到125度不变形. 无DNase.RNase.等透光性好,低背景荧光;加工均一,规格切合所用PCR的孔位. 我想到的就这么多,祝愉快!

花追茗2482实时荧光定量pcr请有配过taqman探针的同学,告诉我如何从母液中配置成工作液,母液管壁标有od=2,nmoles=9.12,如何稀释母液啊 -
管中栋13737966050 ______[答案] 探针附带的说明单子上有说明的 ,有说加多少灭菌水或TE可以变成100uM的母液

花追茗2482FRET引物是什么 -
管中栋13737966050 ______[答案] Taqman探针法的出现是定量PCR技术的重要里程碑,之后在此基础上发展出了杂交探针法,以及荧光引物法,是对探针法的不断改进和简化.如果希望全面掌握定量PCR技术的研究人员就不能错过这些定量检测技术. 要提到荧光探针或者荧光引物,...

花追茗2482实时荧光定量PCR结果无法分析,求助 -
管中栋13737966050 ______ 实时荧光定量PCR结果无法分析 所谓实时荧光定量PCR技术 ,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法. 检测方法 1.SYBRGreenⅠ法: 在PCR反应体...