trizol提取血液rna
TRIZOL是一种新型总RNA抽提试剂，可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。TRIZOL的主要成分是苯酚。TRIZOL在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性，因此对纯化RNA及标准化RNA的生产十分有用。
TRIZOL是由Invitrogen（现在属于Thermo Fisher Scientific）公司开发的试剂。该公司于1992年推出了TRIZOL试剂，用于细胞和组织中核酸的提取。TRIZOL基于一种名为"acid guanidinium-phenol-chloroform"（酸性胍-酚-氯仿）的三重相分离方法。TRIZOL的开发源于20世纪70年代末和80年代初的研究工作。在当时，科学家们对于高质量的RNA提取方法感兴趣，因为高质量的RNA对于各种分子生物学研究非常重要。然而，传统的RNA提取方法受到DNA和RNA降解、样品丢失等问题的影响，提取效果不佳。为了克服这些问题，一个名为Chomczynski和Sacchi的科学家团队提出了酸性胍-酚-氯仿三重相分离方法。该方法基于胍的碱性特性，通过胍与DNA或RNA结合以避免降解。酚用于裂解细胞，并与酸性胍和核酸形成络合物，从而将核酸保护在有机相中。氯仿用于分离蛋白质和界面相中的DNA/RNA复合物。Invitrogen公司在Chomczynski和Sacchi的方法的基础上开发了TRIZOL试剂，并于1992年推出。TRIZOL在分子生物学研究中得到广泛应用，成为提取总RNA、DNA和蛋白质的常用试剂之一。
TRIZOL的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞，使细胞中的蛋白，核酸物质解聚得到释放。苯酚虽可有效地变性蛋白质，但不能完全抑制RNA酶活性，因此TRIZOL中还加入了8－羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase（RNA酶）。TRIZOL是从细胞和组织中提取总RNA的即用型试剂，在样品裂解或匀浆过程中，TRIZOL能保持RNA完整性。加入氯仿后，溶液分为水相和有机相，RNA在水相中。取出水相，用异丙醇可沉淀回收RNA。TRIZOL试剂是一种单步法的试剂，能够在一个试管中完成细胞裂解和核酸、蛋白质的提取。其作用原理可以分为以下步骤：
1.细胞裂解：TRIZOL试剂中含有酚，可以迅速破坏细胞膜，使RNA、DNA和蛋白质释放出来。
2.聚集：TRIZOL试剂中含有胍类化合物（如盐酸胍），可以使RNA和DNA在酚的存在下与胍形成络盐，从而使RNA和DNA聚集在有机相中，保护核酸不被降解。
3.盐析：TRIZOL试剂中的氯仿用于与有机相中的RNA/DNA络盐形成亲水相，从而将RNA/DNA精准分离出来。同时，蛋白质也会被分离到氯仿相中。
4.进一步纯化：得到的RNA/DNA可以通过洗涤、乙醇沉淀等方法进一步纯化，以获得高质量的核酸样品。
总体来看，TRIZOL试剂通过胍和氯仿的配合使用，可完成细胞/组织的裂解、RNA/DNA的提取和蛋白质的分离，具有操作简便、提取效率高、成本较低等特点，因而成为常用的核酸提取试剂之一。
检测小贴士！
在平时处理需要提取RNA的送测样品时，如果样本量过于少（比如细胞或者少量的菌体沉淀等样品），可以在去掉培养液后加入适量的TRIZOL后再进行样品寄送，可以减少样本降解的风险。血液样本除了可以加抗凝剂或用抗凝管寄送外，也可以按3mL血液样本加入9mL TRIZOL试剂的比例（1:3）混匀后寄送。
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花兴逄1416如何提取血RNA -
程振飞19171793481 ______ 都应该是可以的.不过提取RNA一般都用kit(试剂盒),RNA和DNA不一样,杂质多,易降解,所以基本上不用自己配的溶液提. 虽然我个人没有做过,但是全血和血清中提取RNA都是可以的,只是用的trizol和提取组织细胞中的不一样. 你尝试搜索一下Trizol LS,看看是不是你需要的.
花兴逄1416海马神经元细胞采用trizol总提法提取ran,浓度太低是什么原因 -
程振飞19171793481 ______ 最好在4度下离心.因为在4度下,RNA酶的活性低,总RNA降解的也就越少.在常温下离心RNA比4度更容易降解.
花兴逄1416怎样提取自己的DNA样本 -
程振飞19171793481 ______ 动植物组织mrna提取: 一、材料 鹅组织 二、设备 研钵,冷冻台式高速离心机,低温冰箱,冷冻真空干燥器,紫外检测仪,电泳仪,电泳槽. 三、试剂 1、无rna酶灭菌水:用将高温烘烤的玻璃瓶(180℃ 2小时)装蒸馏水,然后加入0.01%的...
花兴逄1416求TRIZOL提取RNA的详细步骤 -
程振飞19171793481 ______[答案] 厚百提供:1、在提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10 ╳106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞.2、将组织或细胞的Trizol裂解液...
花兴逄1416想请教用过Trizol法提取RNA,且结果比较理想的详细步骤及注意事项,是否可以共享一下,谢谢 -
程振飞19171793481 ______ 我这边刚好在做,给你说下: 贴壁细胞的话去培养液,PBS洗一遍,加Trizol吹打下来.组织的话,在液氮里面捣碎,然后粉末放进Trizol,用超声粉碎器粉碎(超声每3秒,停10秒冷却,直到看不见组织碎末). (此步骤可以-80oC冻存,下面...
花兴逄1416trizol法提取rna如何去除dna
程振飞19171793481 ______ trizol法提取rna如何去除dna1,裂解组织或者细胞使用的TRIzol量偏少;2,使用的组织材料中含有大量的有机溶剂(如:乙醇/异丙醇等)、高纯度的Buffer、碱性溶剂等;3,如果提取的RNA中含有DNA时,也可以使用DNaseI进行DNA消化.这个如果你做反转录的话,只能是用PCR检测了.电泳基本检测不出来.象现在的试剂盒或者TRIZOL提的RNA,除质量太差,一般含基因组很少.如果RT-PCR发现结果不对,可以用那种不含RNA酶的DNA酶处理一下.如果引物能避开的话,有点DNA也没关系.
花兴逄1416我提鸽子血液中RNA,但不能马上做实验,我得如何保存鸽子血液呢?是先加抗凝剂再放冰箱中还是直接放冰箱中
程振飞19171793481 ______ 你好,很高兴能为你解答提问. 最好用新鲜血液提取,不具备条件时先抗凝再冷冻保存. 抗凝剂最好用肝素,因为EDTA可能会对后续的PCR有影响,会螯合PCR反应中的Mg2+,亦可根据实验要求选择适当的抗凝剂. 冷冻血液的保存:先液氮速冻,再置于- 80℃保存. 用TRIZOL试剂盒防止RNA降解. 希望能帮到你.
花兴逄1416TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项? -
程振飞19171793481 ______ 三、Trizol法提取法(这是提禽流感病毒的步骤,供参考) Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.1、取鸡胚尿囊液,加入5-10倍体积Trizol液,混匀;2、室温放置5分钟,然后以每1ml Trizol液加...
花兴逄1416用Trizol法提DNA遇到的问题求教 -
程振飞19171793481 ______[答案] Trizol是用来提取RNA的,因为pH低,所以DNA都是溶解在酚相的,你可以用pH8.0的Tris平衡酚来提取DNA
花兴逄1416trizol处理的样本可以提dna吗 -
程振飞19171793481 ______ 可以的,trizol加氯仿离心后分三层,上中下分别是rna 蛋白质 dna