trizol提取组织rna

TRIZOL是一种新型总RNA抽提试剂，可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。TRIZOL的主要成分是苯酚。TRIZOL在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性，因此对纯化RNA及标准化RNA的生产十分有用。

TRIZOL是由Invitrogen（现在属于Thermo Fisher Scientific）公司开发的试剂。该公司于1992年推出了TRIZOL试剂，用于细胞和组织中核酸的提取。TRIZOL基于一种名为"acid guanidinium-phenol-chloroform"（酸性胍-酚-氯仿）的三重相分离方法。TRIZOL的开发源于20世纪70年代末和80年代初的研究工作。在当时，科学家们对于高质量的RNA提取方法感兴趣，因为高质量的RNA对于各种分子生物学研究非常重要。然而，传统的RNA提取方法受到DNA和RNA降解、样品丢失等问题的影响，提取效果不佳。为了克服这些问题，一个名为Chomczynski和Sacchi的科学家团队提出了酸性胍-酚-氯仿三重相分离方法。该方法基于胍的碱性特性，通过胍与DNA或RNA结合以避免降解。酚用于裂解细胞，并与酸性胍和核酸形成络合物，从而将核酸保护在有机相中。氯仿用于分离蛋白质和界面相中的DNA/RNA复合物。Invitrogen公司在Chomczynski和Sacchi的方法的基础上开发了TRIZOL试剂，并于1992年推出。TRIZOL在分子生物学研究中得到广泛应用，成为提取总RNA、DNA和蛋白质的常用试剂之一。

TRIZOL的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞，使细胞中的蛋白，核酸物质解聚得到释放。苯酚虽可有效地变性蛋白质，但不能完全抑制RNA酶活性，因此TRIZOL中还加入了8－羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase（RNA酶）。TRIZOL是从细胞和组织中提取总RNA的即用型试剂，在样品裂解或匀浆过程中，TRIZOL能保持RNA完整性。加入氯仿后，溶液分为水相和有机相，RNA在水相中。取出水相，用异丙醇可沉淀回收RNA。TRIZOL试剂是一种单步法的试剂，能够在一个试管中完成细胞裂解和核酸、蛋白质的提取。其作用原理可以分为以下步骤：

1.细胞裂解：TRIZOL试剂中含有酚，可以迅速破坏细胞膜，使RNA、DNA和蛋白质释放出来。

2.聚集：TRIZOL试剂中含有胍类化合物（如盐酸胍），可以使RNA和DNA在酚的存在下与胍形成络盐，从而使RNA和DNA聚集在有机相中，保护核酸不被降解。

3.盐析：TRIZOL试剂中的氯仿用于与有机相中的RNA/DNA络盐形成亲水相，从而将RNA/DNA精准分离出来。同时，蛋白质也会被分离到氯仿相中。

4.进一步纯化：得到的RNA/DNA可以通过洗涤、乙醇沉淀等方法进一步纯化，以获得高质量的核酸样品。

总体来看，TRIZOL试剂通过胍和氯仿的配合使用，可完成细胞/组织的裂解、RNA/DNA的提取和蛋白质的分离，具有操作简便、提取效率高、成本较低等特点，因而成为常用的核酸提取试剂之一。

检测小贴士！

在平时处理需要提取RNA的送测样品时，如果样本量过于少（比如细胞或者少量的菌体沉淀等样品），可以在去掉培养液后加入适量的TRIZOL后再进行样品寄送，可以减少样本降解的风险。血液样本除了可以加抗凝剂或用抗凝管寄送外，也可以按3mL血液样本加入9mL TRIZOL试剂的比例（1:3）混匀后寄送。

计进顾4017Trizol法提取流感病毒 RNA -
赖方帜19592185007 ______ 1、取200ul样品数+阴性对照+阳性对照加入1.5ml灭菌eppendorf管; 2、加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀; 3、13000rpm离心15min; 4、在第3步离心快结束时,另取同样多eppendorf管,加入400ul于-20℃...

计进顾4017trizol法提取组织的RNA,只出现了一条条带,且确定不是5S,有可能是18A或28S吗? -
赖方帜19592185007 ______ 肯定不可能是5S,5S能看见的话,28S肯定能看见.很大可能是污染的基因组DNA. RNA电泳中,一般28S与18S都能看见的,且28S的亮度是18S的二倍,5S不一定能看到.

计进顾4017TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项? -
赖方帜19592185007 ______ 三、Trizol法提取法(这是提禽流感病毒的步骤,供参考) Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.1、取鸡胚尿囊液,加入5-10倍体积Trizol液,混匀;2、室温放置5分钟,然后以每1ml Trizol液加...

计进顾4017trizol法提取RNA时如何去除基因组DNA 在哪一步加NDA消化酶 -
赖方帜19592185007 ______ 在trizol里加入三氯甲烷震荡离心后,取上头的水层,只要水层取得干净,没有沾染下头的东西,一般就不会有DNA污染,提取出来蛮干净的.

计进顾4017为什么我提取的RNA会凝固成胶冻状我使用TRIZOL提取动物组织RNA,洗涤干燥后加入RNase - free 水后,几分钟后整个液体就凝固成胶冻状,这是为什么?... -
赖方帜19592185007 ______[答案] 能成凝胶状态的,一种可能是RNA浓度实在是太高了,稀释稀释就能解决问题. 还有一种可能是,你提的不是RNA,而是蛋白.而且是高浓度蛋白

计进顾4017用trizol提取rna时,为什么dna不会溶解在水相 -
赖方帜19592185007 ______ 提取RNA时如何去除DNA的污染的方法: 注意实验室的标准化问题,注意污染的存在,同时严格按照说明书上的操作应该没有 问题.发现DNA污染,用DNAse I 消化1小时,37度 离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体...

计进顾4017如何提取芦荟RNA 最好是苯酚法
赖方帜19592185007 ______ 动植物组织mRNA提取: 一、材料 水稻叶片或小鼠肝组织. 二、设备 研钵,冷冻台式高速离心机,低温冰箱,冷冻真空干燥器,紫外检测仪,电泳仪,电泳槽. 三、试剂 1、无RNA酶灭菌水:用将高温烘烤的玻璃瓶(180℃ 2小时)装蒸馏水...

计进顾4017动物处死后,如何取组织提取RNA,组织用什么液体取 -
赖方帜19592185007 ______ 取出组织,先加入液氮迅速冻住以防RNA降解,适当研磨破壁,然后用Trizol提取

计进顾4017呵呵,提取RNA过程? -
赖方帜19592185007 ______[答案] 现在常用的是Trizol法. 提前将研钵、研棒、剪刀、镊子等用锡箔纸包好200度烘烤6小时,与实验前放到冰箱中预冷.枪头、离心管等DEPC水浸泡处理12小时后,高温灭菌30分钟(也可不用DEPC处理,常规高温灭菌40分钟),整个处理过程必须带...

计进顾4017trizol法提取RNA时如何去除基因组DNA 在哪一步加NDA消化酶,谢谢! -
赖方帜19592185007 ______ trizol法是RNA, DNA提取的,在分层的时候,看你去哪一层了.分层后, RNA是在水相,而DNA是在中间的酚-氯仿层.“一般在加入溶解细胞剂,充分 溶解...