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怎么证明bl21菌株

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-24

暴通狡1114如何根据目的基因选择表达载体和菌株 -
钟殃绍18867029115 ______ 主要看一下目的基因来自什么物种,针对不同的物种选择对应的载体和菌种(或细胞).比如是原核基因,就要用原核表达载体 pET载体,BL21菌株等.

暴通狡1114大肠杆菌BL21(DE3)介绍 -
钟殃绍18867029115 ______ 大肠杆菌bl21(de3)本身含有载体 bl21是常用的表达菌株,一般配合以强表达载体来进行目的基因的强表达.bl21(de3)plyss对λde3(1)是溶源性的.λde3含有t7噬菌体基因i,编码的t7 rna聚合酶受lac uv5启动子的控制.bl21(de3)plyss含有plyss质粒,...

暴通狡1114为什么目的基因要先转移到DH5a,再到BL21 -
钟殃绍18867029115 ______ 不同的大肠杆菌感受态有各自的特点,比如DH5α适合克隆,BL21适合表达,所以会把目的基因转移到DH5α里,在确定克隆、构建载体没有问题之后,再转到表达菌株BL21,反之则不行.为什么?就如每个人在一个体系里有各自的特长和分工一样.

暴通狡1114Rosetta菌株有什么抗性嘛 -
钟殃绍18867029115 ______ Rosetta菌株是有一个氯霉素抗性的质粒在里面的. 如果的你选择的质粒载体是其他抗性的(Amp或者Kana这样的),那么转接到Rosetta菌株里面就需要双抗. 一般抗性都是由质粒载体决定的,普通菌株是没有抗性的(比如BL21(DE3)).

暴通狡1114博凌科为的BL21(DE3) 感受态细胞 怎么样? -
钟殃绍18867029115 ______ 本博凌科为的BL21(DE3)感受态细胞是采用大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA 的化学转化.使用pUC19 质粒检测,转化效率可达107,-70 ℃ 保存几个月转化效率不发生改变.每支感受态可以酌情分装使用,降低了实验的成本.质量稳定,使用方便,质优价廉.BL21(DE3)感受态细胞的基因型为:F - ompT hsdSB(rB -mB -) gal dcm (DE3) 储存:-70 ℃ 保存,避免反复冻融

暴通狡1114对比大肠杆菌 DH5a 与 BL21的异同点,观察两者在生长形态上的差别. -
钟殃绍18867029115 ______ BL21是蛋白酶缺陷株,表达蛋白后不会被降解~所以一般来表达~还有就是BL21生长要比DH5a快~DH5a则是复制会比较稳定,所以常常用来转化智力、制作核酸疫苗~ 麻烦采纳,谢谢!

暴通狡1114BL21trxB (DE3)菌不加卡那会有什么后果 -
钟殃绍18867029115 ______ 加了才会挂吧,BL21是用于蛋白表达的一类工程菌株,工程菌株本身一般不带抗性,导入带有特殊抗性如AMP或者kana的重组质粒,后变成带有特殊抗性的菌株,加抗生素维持主要目的是防止阴性宿主菌的增殖,维持重组质粒在后续表达时的稳定性.

暴通狡1114大肠杆菌BL21最低生长温度是多少? -
钟殃绍18867029115 ______ 10度

暴通狡1114dh5α可以做表达菌株吗 -
钟殃绍18867029115 ______ 不适合,因为它不是蛋白酶缺陷型菌株,因此表达的蛋白很容易降解,常用的菌株是BL21 它是蛋白酶缺陷株.

暴通狡1114为什么构建的表达质粒在bl21中长不起来 -
钟殃绍18867029115 ______ 先连接T载体是为了提高转化效率一般来说市面上出售的T载体都进行了优化,容易连接片段(也就是效率较高),因此构建表达载体时有时会先连接T载体.同时T载体的测序引物比较明确(商业化的缘故),因此测序也方便一些.更重要的是,T载体往往设计了蓝白斑筛选的功能,插入片段的载体会呈现白色,这样也容易区分验证,不用每个单菌落都拿去做colony PCR或提质粒酶切验证.当然也不是绝对的,我们实验室就经常直接把片段酶切后连接表达载体,不经过T载体这一步,其实影响并不大.如果你的情况比较特殊(比如片段较大,或是对应的表达载体拷贝数较低等),可以考虑连接T载体,不然的话不是非常必要.

(编辑:自媒体)
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