bl21可以提取质粒吗

俞肢终2048大肠杆菌感受态BL21和DH5а区别 -
阙侄友14776708900 ______ DH5α是扩增菌,BL21是表达菌 DH5α可以使质粒高拷贝数扩增,BL21利于蛋白的表达,另外表达菌还有很多,ps系列,roset系列等

俞肢终2048请提供一下在蛋白原核克隆、纯化和表达中所需要使用的实验技术,谢谢~! -
阙侄友14776708900 ______ 引物设计,目的基因扩增、纯化,原核表达载体的构建、转化,测序,原核表达,蛋白纯化等.

俞肢终2048设计原核表达载体时,连不上是什么原因 -
阙侄友14776708900 ______ 构建一个新的基因表达载体,通常采用PCR将目的基因调出来.设计引物时从基因的CDS区开始(+1)为上游引物,下游为终止密码子止,再将目的基因转载到载体的MCS区

俞肢终20481、如何以大肠杆菌的质粒DNA为载体克隆一个编码动物的技术的基并使之在大肠杆菌中表达 -
阙侄友14776708900 ______ 最大的问题应该是:大肠杆菌是原核生物,动物基因是真核基因,直接用限制酶切获得的基因在大肠杆菌内表达会错误,应该选择动物的相应基因的mRNA反转录得到DNA,或者根据相应蛋白质的氨基酸排列顺序推测DNA的碱基序列获得DNA. 其余的如楼上后面所答.

俞肢终2048哪些细菌可以制备感受态 -
阙侄友14776708900 ______ 大肠杆菌DH5a大肠杆菌BL21这是实验室常用的两种感受态细胞,前者用于扩增质粒,后者用于表达蛋白.

俞肢终2048转化的感受态有氨苄抗性但是提不出来质粒? -
阙侄友14776708900 ______ 这个问题可以从几外方面着用排查,一个,氨苄是否失效?失一个厂家的或者批次的试一下. 细菌是否产生抗性?我不加质粒,直接用感受态涂板,看是否能长出来. 质粒提取是否出问题了?挑起菌落,去摇菌,而不是用菌落去提质粒. 最后,你是如何知道没有质粒的?电泳检测还是PCR检测?如果电泳检测,可能是质粒含量太低,检测不出来(可以将提出来的质粒重新转化一次,这样会比连接产物的效率高).如果是PCR检测,一个是PCR系统是否正常?另一个,是否提出来的质粒并不是我们克隆进去的质粒(感受态细胞受到质粒污染了).

俞肢终2048基因工程中选择大肠杆菌作为受体细胞的原因是其中含有质粒,这句话为什么错了? -
阙侄友14776708900 ______ 题目中的原因错了. 原因:繁殖速度快,可以在短时间内获得要表达的蛋白质或观察到相应性状表现.且相对于其它微生物体积大,便于操作

俞肢终2048如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码蛋白的基因,并使之在大肠杆菌中表达 -
阙侄友14776708900 ______ 一般程序如下: 获得目的基因-准备表达载体-将目的基因插入表达载体中 (测序验证)-转化表达宿主菌-诱导靶蛋白的表达-表达蛋白的分析-扩增、 纯化、进一步检测. [主要试剂 主要试剂] 主要试剂 1、LB 培养基. 2、 100mM IPTG (异丙基硫...

俞肢终2048SDS碱裂解法质粒DNA小量提取最近在做质粒DNA的提取,做到最后,加入TE还有不容的沉淀,请高手指导一二, -
阙侄友14776708900 ______[答案] 不知道你是手提还是试剂盒提质粒,试剂盒我没碰到过这样的状况,如果是手提,一般考虑蛋白没有除干净,如果电泳质粒没有问题,不用去管,如果后续实验对质粒要求较高,可以考虑再次除蛋白,但是质粒也会损失,或者重提质粒时,将除蛋白...

俞肢终2048为什么DH5a不能做表达菌株? -
阙侄友14776708900 ______ DH5α是DNA酶缺陷株,利于做克隆,保存已有质粒,但它蛋白酶没有缺陷,因此表达的蛋白很容易降解.做表达最常用的菌株是BL21,它就是蛋白酶缺陷株,有利于防止蛋白降解.