bl21+de3+菌株
金融界2024年4月6日消息，据国家知识产权局公告，成都康华生物制品股份有限公司申请一项名为“一种CP1载体蛋白、其制备方法与包含其的多糖结合疫苗的制备方法“，公开号CN117820446A，申请日期为2024年1月。
专利摘要显示，本申请公开了一种CP1载体蛋白、其制备方法与包含其的多糖结合疫苗的制备方法，涉及疫苗制备技术领域。一种CP1载体蛋白，其氨基酸序列如Seq ID NO.1所示。CP1载体蛋白的制备方法，包括以下步骤：选取BL21(DE3)菌株作为表达宿主菌，以pET‑28a作为表达质粒，构建CP1载体蛋白的重组工程菌；将重组工程菌进行高密度发酵，培养结束后，离心，收集菌体；将菌体进行蛋白变复性处理，再浓缩，得到CP1载体蛋白原液；将CP1载体蛋白原液经过阴离子交换层析纯化，洗脱并收集洗脱峰所对应的蛋白，即得CP1载体蛋白。该CP1载体蛋白可作为多糖结合疫苗开发的候选载体蛋白，用于预防C群脑膜炎奈瑟氏球菌。
本文源自金融界
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冉矩左1740表达菌,克隆菌问题 -
米平天18822471927 ______ JM109,DH5a,TOP10是常用的克隆菌株 BL21是常用的表达菌株 E. coli克隆菌株,种类非常多,常见的还有HB101,XL1-Blue等等,根据你克隆的方法和目的不同,有不同的选择. 表达菌株我所了解的只有BL21和他的衍生菌株,像BL21(DE3)等等,其他的就不清楚了. 如果你想知道更详细的,找本最新版的《分子克隆》,或者类似的书看看.
冉矩左1740pegx - gst必须要在BL21中表达吗 -
米平天18822471927 ______ 当然不是 pGEX全系列都有tac启动子,不需要T7启动子 多种大肠杆菌宿主菌株可用于pGEX载体的克隆和表达,BL21(DE3)是最常用的一种.其他如Rosetta pLysS肯定也是能用的.
冉矩左1740pet 28 宿主菌dh5 可以用来表达吗 -
米平天18822471927 ______ 大肠杆菌DH5α一般做克隆或保存质粒用,BL21用来做原核表达用.BL21(DE3) 菌株用于高效表达含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因,表达效率高.T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上.DH5α可以表达抗性基因,应该也能表达外源基因,但是我们一般不用该菌作为表达菌,可能与表达量、表达产物活性有关.毕竟体外表达活的的产物是为了继续做下面的工作,没有表达量,后面什么工作都无从谈起了
冉矩左1740大肠杆菌bl21为什么可以用来表达蛋白? -
米平天18822471927 ______ 一般克隆用菌如DH5α,质粒高拷贝,但诱导表达就不行.BL21等典型表达菌株,用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因.T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上. 不好意思粘了一些内容. BL21如果用于保存质粒,质粒可能突变,提质粒也不好,提到的质粒可能还会影响下一步操作如酶切. 具体可以Google查下,有篇讲菌株选择的文章不错,发给你也可以
冉矩左1740LacIq基因与LacI基因有何区别 -
米平天18822471927 ______ Xl1-Blue菌株 基因型:endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F'[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+). 特点:具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性. 用途:分子克隆和质粒提取. BL21(DE3)菌株 基因型:F– ompT ...
冉矩左1740大肠杆菌BL21最低生长温度是多少? -
米平天18822471927 ______ 10度
冉矩左1740真核生物的基因在E.coli中如何表达 -
米平天18822471927 ______ 首先提取你要的目标真核生物的mRNA,然后做反转录PCR,设计引物的时候注意上游引物要包含启动子和下游引物要包含终止子,这样才能获得完整的编码序列.然后你需要将你的反转录PCR产物进行序列测定,当然如果你这个是已知序列则...
冉矩左1740roseta菌株诱导表达,加入IPTG后发生菌溶现象,菌液变粘稠清亮,没有表达蛋白 -
米平天18822471927 ______ 可能是你的菌污染了,加入IPTG后菌会发生变化比原来的要清一点,但不会粘稠.你可以换用BL21(DE3 )试一下.只要你的蛋白含有的稀有密码子不是很多,BL21 的效果是相同的.
冉矩左1740大肠杆菌感受态制备时为什么用无抗性的培养基? -
米平天18822471927 ______ 因为感受态细胞本来就不具备抗性. 后期用载体质粒转化感受态细胞时,我们就是根据 转化成功的大肠杆菌(载体质粒进入该感受态细胞)能在含抗生素的培养基上生长 而转化不成功(载体质粒没有进入感受态细胞)的感受态细胞则由于没有抗性而不能生长 这一原理来判断是否转化成功.
冉矩左1740大肠杆菌bl21高密度发酵溶氧量多少 -
米平天18822471927 ______ E.coliBL21(DE3)及其磷酸转乙酰基酶(PTA)缺陷变株FR55发酵过程中菌体生长和有机酸产生情况,并以肿瘤坏死因子(TNF)为外源蛋白表达的模型考察了pta基因缺陷对外源蛋白表达的影响.在摇瓶培养条件下,pta变株TNF的表达水平比亲株提...