qpcr引物和pcr引物的不同

孙韦贝4302引物的作用?为什么DNA聚合时要引物先与另一条链结合,俩条链才能结合?引物在其中起到了什么作用?PCR技术里引物是启动子吗?那普通聚合时它也... -
庞逄真13632377143 ______[答案] 因为DNA聚合酶不能直接在一条DNA单链上复制,一定要先让一小段寡核苷酸与模板DNA互补配对,然后聚合酶才能在引物的一端继续复制下去

孙韦贝4302PCR复制n次,至少需要加入多少引物? -
庞逄真13632377143 ______ 10uM浓度的引物,加个1ul足矣.在PCR反应中,经过n次循环,理论上DNA链的数目扩增了2的n次方.PCR的一个循环,一个DNA模板被复制为2个DNA片段. PCR循环次数通常就是30左右.循环数太多了,虽然在一定程度上能够提高产物量...

孙韦贝4302pcr引物的设计有哪些要求 -
庞逄真13632377143 ______[答案] 引物的设计一般要考虑以下几个问题:1.长度,至少要16bp,通常为18-30bp2.解链温度(Tm值)3.避免引物内部或引物之间存在互补序列(3个碱基),从而减少引物二聚体的形成以及引物内部二级结构的形成4.G+C含量尽量控制在...

孙韦贝4302PCR技术里面用到的引物,在生物体内细胞分裂的DNA复制的时候,是不是也存在? 是用什么替代的?还是不用的 -
庞逄真13632377143 ______ PCR反应中有两条引物,即5′端引物和3′引物.设计引物时以一条DNA单链为基准(常以信息链为基准),5′端引物与位于待扩增片段5′端上游的一小段DNA序列相同;3′端引物与位于待扩增片段3′端的一小段DNA序列互补. DNA的复制需...

孙韦贝4302PCR扩增DNA的操作里 为什么要用引物? -
庞逄真13632377143 ______ 因为DNA聚合酶需要结合在双链区域,才能启动后续的脱氧核糖核苷酸的聚合作用.因此需要引物(PCR中是DNA,而生物体内是RNA)来构成双链区,从而使DNA聚合酶识别并结合,启动聚合作用.

孙韦贝4302PCR技术中引物有什么作用,没它能行吗 -
庞逄真13632377143 ______[答案] PCR的引物有2个用途:定位和DNA合成的起始点.PCR中使用的DNA合成酶只能在已有的引物的3'端添加,不能从头合成. 自然情况下,DNA复制的时候也是有引物(RNA)的.

孙韦贝4302利用PCR技术扩增目的基因时,引物Ⅰ和引物Ⅱ是相同的吗?如果相同,为什么把它们分开命名? -
庞逄真13632377143 ______[答案] 不相同,而且是从根本上就不同,即序列不同. PCR扩增是一段目的基因,”目的“的意思就是指定的序列,指定的方法就是前后各用一条引物定位.所以两条引物一般称为”上游引物“和”下游引物“.两引物分别对应不同的序列,中间就是需要扩增...

孙韦贝4302实时定量pcr - ------做实时定量PCR和rtPCR能用一样的引物吗? -
庞逄真13632377143 ______ 不一样啊,通常情况下realtime PCR的引物长度会比较短一点 如果你的RT-PCR引物在300以内,应该做realtime也没问题,反正之前有用过的BIODAI就是这样的.RT-PCR逆转录部分加的是随机或者oligo引物啊,并非扩出目的基因啊,得到的cDNA可以做QPCR或者普通PCR,这个时候引物是一样的,只是浓度不同.

孙韦贝4302PCR技术中不是必须要在引物后面形成DNA链么?那不是越来越短么?怎么生成大量DNA链的呢? -
庞逄真13632377143 ______[答案] PCR反应中有两条引物,即5′端引物和3′引物.设计引物时以一条DNA单链为基准(常以信息链为基准),5′端引物与位于待扩增片段5′端上游的一小段DNA序列相同;3′端引物与位于待扩增片段3′端的一小段DNA序列互补. DNA的复制需要RNA引...