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怎么设置跑溶解曲线

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-22

贡怖庄4118您好,溶解曲线设置的时候,我用的机器默认的是从高温到低温再到高温,我想知道荧光信号的收集是在哪一步 -
伏顺亭13680305449 ______ 不应该引物二聚体,当然,更告诉NTC做控制决定的结果,然后结合的电泳结果.在正常情况下,引物二聚体的Tm值在78℃左右.

贡怖庄4118定量PCR法中,Taqman探针法需要做溶解曲线吗?为什么? -
伏顺亭13680305449 ______ 正常情况下是不需要的,溶解曲线是在SYBR Green法中利用染料在DNA解链时释放不发射荧光,而在DNA双链时与其结合发射荧光的原理制作溶解曲线的,而Taqman探针在PCR反应时其寡核苷酸链由于被DNA聚合酶的外切酶活性给切断,所以不能重新再结合故不能形成探针,所以不需要做溶解曲线.再一个,溶解曲线只是为反应体系中判断是否有非特异性扩增提供一个侧面的依据,适用于染料法.而探针法的特异性很高,从这方面来看也是不需要的.

贡怖庄4118九年级化学溶解度曲线怎么做
伏顺亭13680305449 ______ 没有具体的问题,不是太好回答 我只说下方法: 1.溶解度曲线上某点的含义.考察读图,说出某个温度下某物质的溶解度 2.两物质溶解度曲线交点的含义.该温度下两物质溶解度相等. 3.根据溶解度变化情况进行物质的分离或提纯. 一般是提取溶解度受温度影响较大的物质时,使用降温结晶(又称冷却热饱和溶液) 提取溶解度受温度影响较小的物质时,使用蒸发结晶. 说的主要是原理,如果有具体问题还可以说的更详细点,希望对你有所帮助!

贡怖庄4118荧光定量pcr溶解曲线为什么会有一个急剧的上升连着急剧下降,形成一个峰. -
伏顺亭13680305449 ______ 随着温度升高,当温度达到Tm值时候,DNA就会变性分成单链的,此时荧光染料不能结合NDA所以检测的荧光型号越来越弱. 你说的出现的峰是荧光性号对温度求导后得到的曲线图,出现峰是因为在接近Tm值的位置荧光性号下降的斜率很快导致在对温度求导后出现峰. 出现单峰说明没有非特异性的结合和引物二聚体的产生.

贡怖庄4118溶解曲线为什么出现双峰 -
伏顺亭13680305449 ______ 溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是没有荧光值变化的,自然就没有溶解曲线了.但是假如你用的分子信标探针或者sybgreen燃料,情况就不同了.

贡怖庄4118荧光定量PCR 溶解曲线与什么有关 -
伏顺亭13680305449 ______ 荧光定量PCR 溶解曲线是验证有无非特异性扩增的, 与引物的溶解温度有关

贡怖庄4118化学绘图软件绘制溶解度曲线的 -
伏顺亭13680305449 ______ 可以采用Origin将实验测得的数据用函数拟合成工作曲线, 达到你的目的

贡怖庄4118溶解度曲线上的点 -
伏顺亭13680305449 ______ 1、一般来说升高温度可以,但有某几种不可以2、还有改变溶剂

贡怖庄4118溶解曲线不好荧光定量pcr的数据就用不了吗 -
伏顺亭13680305449 ______ 溶解曲线不好,说明有非特异性产物扩增,也就是说PCR信号不是你要检测的那段序列所产生的,很可能有多个非特异性判断.数据就不能要了

贡怖庄4118溶解度曲线有哪些应用? -
伏顺亭13680305449 ______ 溶解度曲线的应用1.查找指定温度时物质的溶解度,并根据溶解度判断溶解性.2.比较相同温度时(或一定温度范围内)不同物质溶解度的大小.3.比较和确定物质的溶解度受温度影响的程度,并据此确定物质结晶或混合物分离提纯的方法.4.确定溶液的状态(饱和与不饱和).

(编辑:自媒体)
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