电泳出现杂带的原因
禹祁欣4248琼脂糖电泳时为什么会在引物二聚体的 后面一点点紧接着出现一条带? -
荣于杜19261673613 ______ 在我印象里我们实验室PCR没出现过这种情况,也没有人专门研究这种情况,文章估计就更没有了=.=我提一点我自己的看法吧.你们做过没做过对照试验?如果没有的话建议做两个对照试验:一是PCR体系里加模板和酶,不加引物;二是PCR体系里加引物和酶,不加模板.这两个和正常实验组一起P一起跑胶,然后对照着看一下,到底是哪个组分的问题.另外,不涉及保密内容的话,能否多提供给我一点信息?你们这个酶做其他PCR也用了吗、效果如何?模板用的cDNA还是什么?PCR目的片段多大?跑胶浓度多大?甚至能不能把电泳图附上?大家一起研究一下就好.
禹祁欣4248dna提取中电泳检测有拖带是什么原因 -
荣于杜19261673613 ______ 有拖尾一般是降解了,应该考虑优化试剂体系和提取步骤. 可以试试用试剂盒提取,我们实验室一般用吉恩特的试剂盒,跑电泳的时候基本没有拖尾
禹祁欣4248质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事 -
荣于杜19261673613 ______ 更改PCR条件~提高退火温度~延长时间适当增加减少再看看~
禹祁欣4248琼脂糖凝胶电泳和醋酸纤维素薄膜电泳的条带出现跑带,拖带,多带以及其他可能出现的状况分别是什么原因啊 -
荣于杜19261673613 ______ 能不能附上你跑完的凝胶图上来? 三个大的方面: 1.样品处理问题.样品纯度差,跑DNA电泳时有杂质蛋白污染(琼脂糖的话可以在紫外光下检查上样孔是否有白色亮团);样品上样前已有部分程度的降解(拖尾). 2.试剂问题.凝胶要配好一点(尽量用新鲜的试剂,新鲜配制后即电泳),胶的浓度把握到位.
禹祁欣4248PCR电泳出现非特异条带原因概括地讲…… -
荣于杜19261673613 ______[答案] 出现非特异性扩增带 PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带.非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、 或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度...
禹祁欣4248pcr电泳出现模糊团状条带是什么原因造成的 -
荣于杜19261673613 ______ 主带显著的情况下,很可能是引物聚合体.如果没有出现显著的你想要的主带,则是非特异扩增产物.第一种情况没事不用理会,第二种情况需要筛查模版中与引物的非特异性互补区...
禹祁欣4248RNA 电泳出现4条带,不知道什么原因 -
荣于杜19261673613 ______ 其实你要首先理解一下电泳染色的原理. 电泳时,我们一般使用的染色剂比如EB啊,GEL-Red啊之类的,都是潜入DNA双螺旋的分子间,所以能拿来作为结合染色染料.而对于RNA,其大多为单链形式存在,这些染料还能进行染色的原因,是因为其的大分子还能发生自身或相互间的2级缠绕,使得染料还有掺入的余地. 那么,如果这些大分子发生降级或者片段化成为小片段,发生自身缠绕的和相互聚合的几率及小了很多,染料难于掺入,当然不显色. 而对于测OD值来说,我们关注的是其吸光度,吸光度这与RNA中的碱基有关,与分子结构无关,所以当然能测出值来.并且,降解和片段化的程度越高,暴露出的碱基愈多,吸光度也越大,测出的值当然也越高,这是不矛盾的.
禹祁欣4248DNA酶切后电泳,条带呈复带的原因做双酶切,跑出来每个带都像一个“=”,都分别由两个极近的带组成.求可能的原因 -
荣于杜19261673613 ______[答案] 你酶切的DNA是什么? 质粒的话,双酶切中间有几十bp以上,切出来的条带就是两条,这个你应该能判断的. 如果是pcr产物酶切出现了两条极近的带,那么很有可能是因为pcr产物纯化时有杂带污染,一开始跑胶的时候看不出来,后来你回收浓缩再...
禹祁欣4248大肠转化后提的质粒,跑电泳出现3条带,求高人解释每条带分别是什么?(第一列是空质粒) -
荣于杜19261673613 ______[答案] 质粒DNA分子具有三种构型:共价闭合环DNA(cccDNA,SC构型)、开环DNA(OC构型)和线性分子(L构型).在细菌体内,质粒DNA是以负超螺旋构型存在的.在琼脂糖凝胶电泳中不同构型的的同一种质粒DNA,尽管分子量相同,但具有不同的电泳迁移...
禹祁欣4248...后面一点点紧接着出现一条带?最近跑电泳时,经常在引物二聚体的后面紧接着出现一条亮度和引物二聚体差不多的条带,刚开始以为是引物做PCR引起的... -
荣于杜19261673613 ______[答案] 在我印象里我们实验室PCR没出现过这种情况,也没有人专门研究这种情况,文章估计就更没有了=.=我提一点我自己的看法吧.你们做过没做过对照试验?如果没有的话建议做两个对照试验:一是PCR体系里加模板和酶,不加引物;二是PCR体系里...