菌液pcr电泳图

庾健梁4177菌液PCR可靠吗 -
邵净飞13258172813 ______ 不知道您做菌液PCR的目的是什么.如果是鉴定构建好的克隆或者亚克隆,那么菌液PCR就完全没有问题.PCR体系也可以小一些,只要注意,菌液的量一定不能过多,一般10ul的PCR体系中,加入过夜培养的菌液0.5ul就可以了.或者不用那...

庾健梁4177哪位高人看看PCR跑电泳跑成这个样子的?这是什么原因...望告知 非常感谢~! -
邵净飞13258172813 ______ 个人觉得有几个原因: 1. 可能凝胶没有融化好,里面有小颗粒. 2. 胶没有完全凝固就拔梳子和跑电泳. 3.梳子没洗干净,上面可能有脏东西污染了样品孔; 4. DNA稍微有点多,用一半量应该可以了. 5.电泳电压有点大.

庾健梁4177下图是细菌DNA和质粒的电泳图,marker很正常,dna和质粒作为太严重了.麻烦哪位大仙帮分析一下,谢谢! -
邵净飞13258172813 ______ 1、Marker没问题,说明胶和电泳没有问题,问题出在提取的产品上.2、基因组拖尾严重,一部分在孔内没有电泳出来,一部分跑到了前端,说明提取过程中蛋白污染,DNA纯度低,另外,部分DNA被降解成小分子的片段,提取条件需要优化.3、质粒没有提出来,原因有很多可能,比如菌量不够,菌长老了,质粒被降解,等等,重新摇菌提取是惟一的办法.

庾健梁4177【求助】菌落PCR有目的条带与菌液PCR却什么都没有? -
邵净飞13258172813 ______ 高手们好.最近做酶切连接转化,最后做鉴定时,以菌落为模板进行PCR时可以见到有目的条带;当把菌落接种到LB液扩菌后,以菌液为模板进行PCR时却什么东东都没有?请问会是什么原因啊?多多指教啊!建议重新以菌落为模板进行PCR...

庾健梁4177问一下你做过从真菌中提取DNA,然后pcr,再跑电泳检测吗?容易得到结果不? -
邵净飞13258172813 ______ 我们做的是基因重组. 一般来说提取PCR跑电泳可以得到结果而且比较容易. 首先你要知道该真菌的基因组,可以去NCBI查,设计引物再PCR,你可以纯化或不纯化PCR的产物,最后电泳检测.

庾健梁4177什么是菌液pcr? -
邵净飞13258172813 ______[答案] 用菌液行PCR还有一个小窍门,省很多事,就是你在挑菌落进行培养时准备1.5ML的EP管,每个管中加入1ML培养基,用接种针挑取菌落接种于EP管中,摇菌几个小时,摇动EP管观察,如果发现有混浊即可用来PCR.我从一开始就用这一方法,非...

庾健梁4177PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后... -
邵净飞13258172813 ______[答案] 你的目的片段长度为500bp,而你的电泳图谱显示是750bp;你对电泳图谱750bp的片段是认可的,也就是说除去目的片段500bp,还有150bp的引物及其他序列;而你的杂带大小平均恰好是150bp,也就是除去150bp的引物及其他序列,应...

庾健梁4177请设计实验方案,使凝胶电泳、PCR、分析杂交三项技术均得到应用. -
邵净飞13258172813 ______ 不知道你说的分析杂交指的是不是Southern blot.举个例子:希望构建某个物种的cDNA文库,并从中检测是否有目的基因的表达.首先要做的就是确定你的研究物种和目的基因是什么.1. 将该物种组织或细胞中提取total RNA, 利用RACE或...

庾健梁4177pcr 电泳图 什么都没有 -
邵净飞13258172813 ______ 造成电泳没有条带的原因是多种多样的,1、mRNA提取是不是成功,有没有降解,(可以稍微取一点跑个电泳或测OD值)2、反转录产生cDNA是不是成功的,就是引物的设计是不是合适3、PCR扩增是的温度是不是合适的