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非预染蛋白marker怎么用

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-24

饶乖何3380哪位高手可以告知 SDS - PAGE 中所用蛋白 Marker 的制作方法,最好详细点,谢谢! -
谷兰邢14761483105 ______ 这个说起来就麻烦了,一般的个人,没有色谱之类的很难做.或者做出来成本太高. 目前有两种方案,一种是买来纯化好的蛋白(SDS-PAGE级别的)自己混合就行了.这种方法简单,但成本高,这种蛋白比较贵.只有少量的蛋白,如BSA,一般的便宜货可以达到SDS-PAGE级(电泳只有一条带).其他的很难. 另一种是自己纯化了,一些粗品自己用离子交换等其他的方法纯化.有些可能得经过几次纯化才能得到理想的蛋白. 如果你是公司,自己想做蛋白 Marker ,后一种方法当然是首选,但得自己摸索,如果是自己用一用,买现成的蛋白 Marker 最合算了. 或者你用量虽然大,但只要其中一两个条带,可以订购那种纯化好的蛋白.

饶乖何3380琼脂糖凝胶电泳marker的作用 -
谷兰邢14761483105 ______ 你好,琼脂糖凝胶电泳marker是用来做参考的,类似于标尺的作用.marker会跑出很多条带,对应带的片段长度是一定的(不同的marker,不同,可以查询);通过找到与样品平齐的带,可以间接地判定样品的片段长度.这是我个人的理解,不知道描述清楚了没.

饶乖何3380生物学上marker是什么意思
谷兰邢14761483105 ______ 从文字上说,标记(Marker),染色体上一个可以被识别的区域(比如限制性内切酶的酶切点,基因的位置等).标记的遗传能够被检测出来.标记可以是染色体上有表达...

饶乖何3380那位老师使用过博凌科为的蓝色预染蛋白质Marker(低),求操作方法?
谷兰邢14761483105 ______ 使用方法: 1.室温融解Marker或37- 40°C 温浴几分钟使之融解,不要高温加热 . 2. 轻轻涡旋以确保混匀. 3. 上样电泳. 使用注意: 1.该Marker不能用于活性蛋白电泳来预测蛋白分子量大小. 2. 蛋白与发色团共价结合会影响蛋白移动速率,所以预染蛋白Marker只能用于大致估量目的蛋白的分子量大小.每一批预染蛋白分子量Marker都相对于未预染蛋白分子量Marker进行了矫正

饶乖何3380怎样计算电泳中蛋白分子量 -
谷兰邢14761483105 ______ 1.首先要选择一款未经过染色的蛋白Marker,和你所要确定分子量大小的蛋白一起电泳. 2.在电泳过程中尽量选择靠中间的泳道,避免边缘效应引起条带歪斜,没有样的孔用loading填满. 3.电泳结束后,考马斯亮蓝染色. 4.如果有凝胶成像系统,可以直接先拍照,然后用系统带的软件,根据Marker每一个条带的位置,分析目标蛋白分子量. 5.如果没有这种系统,就只能用土一点的办法,量每一个Marker条带相对于加样孔的迁移量,对应每个条带的分子量做标准曲线(excel可以),通过标准曲线得到的方程和目标蛋白的迁移率计算目标蛋白的分子量大小就可以了.

饶乖何3380哪种预染低分子量蛋白Marker好 -
谷兰邢14761483105 ______ 合适的就好.一般看Marker条带是否清晰锐利,是否均匀,纯化不够的Marker会成“团”而不利于判断大小.厚百holdbio上的彩色预染超低分子蛋白质分子量标准(AR1117),表观分子量范围1.7 - 40 kDa,颜色锐利稳定,不妨看看(百度一下holdbio).

饶乖何3380SDS凝胶电泳过程中向正极泳动的蓝色条带是什么物质 -
谷兰邢14761483105 ______ 奇怪的问题哦,正负极没变化呀,只是蛋白被SDS包被以后带了负电因此向正极泳动.

饶乖何3380鉴定蛋白跑电泳的几种方法和对照蛋白的选择我目前只知道有聚丙烯酰胺
谷兰邢14761483105 ______ 蛋白Marker:一般14 kD到200 kD 高分子量 低分子量 广谱 多肽 未染色 预染 500UL 双色预染 一般不知道跑的蛋白质分子量就用广谱的蛋白质电泳方法:据带电量分离的等电点电泳(二维电泳),根据分子量分的是用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(常用)双向电泳(2DE)原理:2DE就是第一向采用等电聚焦分离,第二向为SDS-PAGE分离.由于2DE是依据蛋白质的两种不同性质,即等电点和分子量进行分析,因此分辨率远高于其他任何一种单一的电泳方法,是目前分析混合蛋白质样品最有效的手段.

饶乖何3380彩色蛋白marker哪个公司好 -
谷兰邢14761483105 ______ thermo fisher公司的彩虹marker不错

饶乖何3380western blot 的marker是怎么定的 -
谷兰邢14761483105 ______ 电泳后会显示一个条带,这个散开的条带可以: 1 在SDS-PAGE中监测蛋白的迁移; 2 确认转膜效率; 3 根据marker的条带估计分子量; 4 确定目的蛋白位置.

(编辑:自媒体)
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