qpcr中cdna浓度

蒋婉尤2572“RT - PCR扩增目的基因cDNA”需要注意的事项有哪些? -
冉瑞钩18899814856 ______ RT-PCR 是将 RNA 的反转录(RT)和 cDNA 的聚合酶链式扩增(PCR)相结 合的技术.首先经反转录酶的作用从 RNA 合成 cDNA,再以 cDNA 为模板, 扩增合成目的片段.RT-PCR 技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基 因表达水平...

蒋婉尤2572【急】【高分】在做Real - Time PCR之前,cDNA的浓度要调平吗?cDNA浓度怎么算啊? -
冉瑞钩18899814856 ______ 看你实验要求,一般实验设计中没必要这么做 现在做绝对定量的很少,如果相对定量,只要找好对照基因即可. 你可能想检查自己的某个基因A表达是否发生变化了,提取了两个样品的cDNA,这种情况下,无需将两个样品的cDNA调整到相同浓度.而是找一个在两个样品中表达基本认为不变的持家基因B,然后对两个样品中的A和B同时都进行实验.通过检测不同样品中A与B的比值,就可以知道A基因表达是否发生变化了.

蒋婉尤2572如何通过qPCR比较不同基因的表达 -
冉瑞钩18899814856 ______ 提取样本mRNA,测提取的浓度,按比例调整浓度保持相近的起始量,做反转录合成cDNA,然后用配套的荧光定量试剂配置上样体系,就可以在Real Time-PCR仪上跑了,然后观察仪器上实时显示的数据和最终结果分析比较基因表达差异

蒋婉尤2572做荧光定量PCR前要做总RNA定量吗 -
冉瑞钩18899814856 ______ 在逆转录之前必须要检测总RNA浓度:1、为下一步逆转录加入总RNA的量提供依据.2、通过260/280比值判定提取的总RNA纯度.

蒋婉尤2572如何用RT - qPCR检测RNA浓度? -
冉瑞钩18899814856 ______ 提总RNA 然后反转录成cDNA 然后做rt-pcr就可以啦

蒋婉尤2572poly(A) RNA 是什么意思 -
冉瑞钩18899814856 ______ 多聚腺嘌呤核糖核苷酸 就是很多个A连在一起组成的RNA啦 原核生物信使RNA的尾部就是POLY A

蒋婉尤2572qpcr的结果是进行测序还是电泳 -
冉瑞钩18899814856 ______ qpcr量进行检测数要看转录组表达量少吧与测序做比没明确意义实要做需要整转录本都进行定量才能比结

蒋婉尤2572pcr的实验步骤是什么样子的?pcr实验步骤
冉瑞钩18899814856 ______ BIOGHC Elitefast SYBR Mix包含dNTP Mix、Mg2 、SYBR Green I;BIOGHC Elitefast ... 当反应结果不理想时,可以在0.1-1.0μM范围内调整引物浓度.qPCR反应灵敏性高,...

蒋婉尤2572什么是总RNA 和Poly A RNA -
冉瑞钩18899814856 ______ 你说的实验应该是RT-qPCR,这个实验的主要目的就是检测RNA的含量的,所以一开始其实是很难给出一个具体的值的.通常建议根据所用的逆转录酶每个反应的RNA的量的大致需求,先完成逆转录反应,例如,下面就列出了某一种逆转录酶要求的模板范围.逆转录酶越好,这个范围就会越宽,主要是可以用的RNA量就可以更少.totalRNA——1pg-5μgpoly(A)RNA——0.1pg-500ngspecificRNA——0.01pg-500ng等到将RNA都逆转录为cDNA后,再进行qPCR的实验.这时候可以将cDNA稀释几个梯度,以获得理想的Cq值.

蒋婉尤2572PCR反应的引物有何种要求? -
冉瑞钩18899814856 ______ PCR引物设计的11条要求1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计. DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的.在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(...