qpcr扩增曲线断崖下降

公哀泽1348qpcr提高引物的浓度,扩增效率怎么变 -
万勇忽15146233616 ______ qpcr提高引物的浓度,扩增效率怎么变 Ct= -k lgX0+ b(线性方程)用这个方程可以通过Ct值算出样品的起始浓度 斜率=-1/lg(1+e) 扩增效率E=1, 斜率=-3.32 扩增效率范围:90%-110% 斜率范围:-3.1和-3.59之间 △△Ct这是相对荧光定量的一个计算公式的简化形式,用于比较不同样品之间的差.

公哀泽1348关于PCR的问题有点糊涂 Real time PCR 和 RT - PCR(逆转录PCR) Q - PCR RT - QPCR -
万勇忽15146233616 ______ 一般RT-PCR指的就是real time PCR,qPCR基本上与RT-PCR是等同的.没有见过RT-qPCR这样表述的.逆转录后再做PCR这是两个独立的过程,先做逆转录,再做PCR,这里的PCR可以是普通PCR,也可以是qPCR.做逆转录的时候一般是需要用管家基因作为内参的,但是qPCR不一定需要,要看你的目的.通过比较管家基因与目的基因在不同条件下的表达水平的差异,是常用的半定量方法,半定量也加相对定量.相应的有绝对定量,就是绘制标准曲线,测目的基因和病原体的拷贝数

公哀泽1348biorad qpcr中途停止会不会丢失数据 -
万勇忽15146233616 ______ 当然会的 ************************************************************** 如果你对这个答案有什么疑问,请追问, 另外如果你觉得我的回答对你有所帮助,请千万别忘记采纳哟! ***************************************************************

公哀泽1348qPCR标准曲线 -
万勇忽15146233616 ______ 无论什么方法都有个检测下限,也就是说,当浓度低于这个值的时候,此种方法就检测不到了,即使有数值也是不可信的. 10^1的单位是“个”copy吗?据我个人的经验,没有什么方法的检测精度有这么高的... (能检测出10个分子,方法本身就可以发science了吧...) 或者,你可以查一下你这个方法的检测下限是多少~ 如果你样品的copy数比较高,前面的点的线性又非常好,大可不必纠结于这一个数值,以前几个做标准曲线就行了~

公哀泽1348qpcr matrix是什么意思 -
万勇忽15146233616 ______ QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System.即实时荧光定量核酸扩增检测系统,也叫实时定量基因扩增荧光检测系统,简称QPCR.

公哀泽1348为什么QPCR引物设计在跨外显子的接头区 -
万勇忽15146233616 ______ 如果反转录体系里面有基因组残留,而且你的引物没有跨内含子,这样的情况下就很容易造成你的Ct偏小(除了cDNA扩增外,基因组的模板也会作为模板进行扩增,导致模板起始量偏高);cDNA逆转后是切除内含子的,而基因组是存在内含...

公哀泽1348如何通过qPCR比较不同基因的表达 -
万勇忽15146233616 ______ 提取样本mRNA,测提取的浓度,按比例调整浓度保持相近的起始量,做反转录合成cDNA,然后用配套的荧光定量试剂配置上样体系,就可以在Real Time-PCR仪上跑了,然后观察仪器上实时显示的数据和最终结果分析比较基因表达差异

公哀泽1348qPCR融解曲线的峰高由什么决定?相同的引物有一模板峰高与其他不同, -
万勇忽15146233616 ______[答案] Tm值相同,而峰高低有差异是表达丰度不同,同样的扩增产物也会出现Tm值有微小差异,一般差异在1度以内都可以接受.融解曲线的纵坐标表示荧光信号对温度的一阶负导数.

公哀泽1348如何绘制表达谱并验证 -
万勇忽15146233616 ______ Q1:你使用什么方法来确保灵敏而特异的miRNA表达谱?为什么?Galina Gabriely(哈佛大学) 我们通常利用多重定量pcr来对少量的人miRNA进行小规模图谱分析.这种方法的灵敏度和特异性比芯片更好,因此在待分析miRNA数量不多时是首...