qrtpcr扩增曲线图解

谷殃维3713pcr扩增曲线图很诡异,有两个平台期 -
狐嵇耍15692623467 ______ 你看的是对数图吧 一般实时定量后会有两个图,一个正常的扩增曲线,一个对应的对数曲线图.

谷殃维3713荧光定量pcr扩增曲线怎样才算好 -
狐嵇耍15692623467 ______ 根据模板的来源不同选择不同的标准品,且浓度已知.标准品可以自己制备也可以购买. 然后在进行定量的时候对标准品进行浓度梯度稀释(5倍/8倍/10倍),由于CT值跟浓度的负对数存在线性关系,所以根据CT值和已知的浓度画出标曲.一般情况下机器会自动给出标曲.

谷殃维3713如果一个基因在某组织中不表达,扩增曲线是怎么样的 -
狐嵇耍15692623467 ______ 扩增曲线部分没有线条,或者杂乱的线条,溶解曲线杂乱没有主峰.荧光采集曲线也没有出现.

谷殃维3713定量PCR的扩增曲线的平台期为什么是锯齿状 -
狐嵇耍15692623467 ______ 很有可能你这个所谓的平台期不是真的平台期,而是非特异性的背景噪音,信号非常弱.放大以后就会是这样了.

谷殃维3713RT - PCR里的CT值到底代表什么意思? -
狐嵇耍15692623467 ______ 阈值指指数增长期荧光信号的临界值,一般PCR仪会自动给出阈值,而CT指就是扩增曲线达到阈值时的循环圈数.

谷殃维3713荧光定量PCR熔解曲线 -
狐嵇耍15692623467 ______ 溶解曲线是在正常的PCR反应基础上加一个溶解曲线的反应条件,其中当温度由60℃升至95℃时,PCR仪每隔一定的温度检测一次信号.最后将收集的信号绘制出溶解曲线,然后将溶解曲线一次微分就会得到我们平时看到的峰性图.每一条线代表着某个孔里的反应体系里产物的单一情况,某一条线如果为单峰且在一定合理的温度范围内(一般为80~90℃)则认为正常,如果为双峰则可能有非特异性扩增.由此可以判断产物是否为目的基因且是否单一.内参有内参的线,目的基因有目的基因的线,同一条线不会出现两个基因的峰.你可以看一下溶解曲线的横、纵坐标.

谷殃维3713荧光定量pcr的标准曲线怎么跑 -
狐嵇耍15692623467 ______ 采用相对法定量要求必须目的基因和内参具有相同的扩增效率,所以需要做efficiency curve如果得到的斜率小于0.1,可以采用相对法,否则,需要重新设计能达到相同扩增效率的引物,或者就需要制...

谷殃维3713甲和乙两个物体在同一直线上运动,它们的速度 - 时间图象分别如图中的a和b所示.在t1时刻( )A.它们的 -
狐嵇耍15692623467 ______ A、B图线在横上方,速度均为正值,表示物体的运动方向均沿正方向,运动方向相同.故A正确,B错误.C、在t1时...

谷殃维3713q - PCR的几个问题? -
狐嵇耍15692623467 ______ 1 可以先平均再求差值,也可以先差值再平均.两种方式的variation应该是一样的.2 可以去掉,但是少于3个的样品没有统计学上的意义.你可以自己看看.1 看内参和目的基因的Ct值没有问题2 对数期的线条应该是比较漂亮的,前头的不好看正常.很有软件有美化这些线条的功能,所以会很漂亮,这个不用太在意,只要你的Ct值重复孔是一样的就好.