takara反转录酶

燕股浦3448PCR仪怎么设置15 min内均速升温 -
仰狱帜13875772790 ______ 比如 从室温20度到65度 相差45度.这样 每分钟升温3度. 你可以设计成每分钟升温3度 也可以设计成 每20秒1度,甚至没10秒0.5度,看你的精确度要求了. 依此,参考PCR仪软件 设计温度-时间运行数据.

燕股浦3448在RNA复制和转录的过程中引物分别是什么? -
仰狱帜13875772790 ______ RNA引物 是一小段单链DNA或RNA,作为 DNA复制的起始点,存在于自然中生物的DNA复制!

燕股浦3448要做全转录组需要多少量的rna -
仰狱帜13875772790 ______ DNA的量≥20μl,浓度≥50ng/μl,每个样最好做三个重复. 测序策略:PE100或PE125 建议数据量: 真核生物: 一般测序:5~6Gb 深度测序:10Gb 原核生物: 一般测序:1Gb 深度测序:5~10Gb

燕股浦3448PCR 实验时逆转录时间少了10分钟会有什么影响 -
仰狱帜13875772790 ______ 得看你是用了什么牌子的反转录的盒子,宝生物的反转录盒子上面说反转录15分钟,不过我们实际操作时就用30分钟,15分钟是底线,所以在特定情况下少个10min没有问题.

燕股浦3448RT - PCR 中 反转之后 PCR部分 DNA 的用量
仰狱帜13875772790 ______ 1)引物在两个条件下都是过量的 2)酶是主要看扩增效率和保证性,量多几个U和少几个U没有很大影响 3)要是你要看基因表达差异的话,用相同的体系就好了,cDNA量也需相同.

燕股浦3448MicroRNA逆转录CDNA -
仰狱帜13875772790 ______ 根据你的反转录引物而定. ①如果是普遍反转录引物,则不需要,也就是反转录用一种引物将RNA全部反转成cDNA 然后定量的时候再使用miRNA和对应的普通基因各自的定量引物. ②若使用的是特异性反转录引物 则需要分开反转录,前面的buffer、酶等能混合,最后要分开,加入各自对应的反转录引物. 无论是普遍反转录还是特异性反转录,均可进行后续的定量.貌似特异性引物更精确.

燕股浦3448怎么看荧光定量PCR的试剂盒好不好 -
仰狱帜13875772790 ______ 如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做.4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦.5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多.

燕股浦3448大片段的RT - PCR -
仰狱帜13875772790 ______ 博凌科为-为你解答:Takara LA Taq酶,体系同说明书.反应程序是:(要求引物Tm值在70度左右,但上下只能浮动2度.Primer 5计算) No. of Cycles Temperature (℃) Duration 1 94 3 min 5 94 30 sec 72 3 min 5 94 30 sec 70 30 sec 72 3 min 25 94 30 sec 68 30 sec 72 3 min 1 72 5 min 1 4 10 min