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qpcr引物和普通引物有什么差别

来源:baiyundou.net   日期:2024-09-21

桓菡宁1719为什么做pcr和测序用的引物不一样
孙绿满19560193514 ______ pcr引物和测序引物是可以通用的,最多是纯化方式不一样,测序的要求高一些. 最重要的是,pcr扩增是从引物开始的,而测序一般要从引物下游几十个bp以后,信号才逐渐稳定,能够读出来.所以拿pcr引物去测序,那只能测出引物下游几十个bp以后的片段,这样你pcr的片段就会测不全.故而需要重新设计测序引物,一般要在所测片段的上游一些.

桓菡宁1719一个qpcr反应中是不是只需要一个探针引物就可以了 -
孙绿满19560193514 ______ 一个qpcr反应中是不是只需要一个探针引物就可以了 一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2*的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以.由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于...

桓菡宁1719PCR中的引物是什么是DNA还是RNA -
孙绿满19560193514 ______ PCR引物又称为寡核苷酸引物,也就是RNA,是由人工合成的,分为两种,引物1和引物2.由于DNA聚合酶只能从核苷酸链的5'端到3'端进行复制,也就是只能识别3'的尾端,而且只能把核苷酸连到已经和DNA模板互补产生的多核苷酸链上,所以引物1和2分别于双链DNA的两条链的尾部(就是末尾是3'端的那一边)结合,为那些脱氧核苷酸提供3'的末端,就相当于开了个头.然后在DNA聚合酶的作用下合成两条新链.而那段引物就成了新链的一部分.

桓菡宁1719利用PCR技术扩增目的基因时,引物Ⅰ和引物Ⅱ是相同的吗?如果相同,为什么把它们分开命名? -
孙绿满19560193514 ______[答案] 不相同,而且是从根本上就不同,即序列不同. PCR扩增是一段目的基因,”目的“的意思就是指定的序列,指定的方法就是前后各用一条引物定位.所以两条引物一般称为”上游引物“和”下游引物“.两引物分别对应不同的序列,中间就是需要扩增...

桓菡宁1719PCR扩增中提到的引物I和引物II是什么? -
孙绿满19560193514 ______[答案] DNA是双链的 2条链各有一个5'端 所以要2种引物 就是 引物I和引物II

桓菡宁1719PCR技术中引物有什么作用,没它能行吗 -
孙绿满19560193514 ______[答案] PCR的引物有2个用途:定位和DNA合成的起始点.PCR中使用的DNA合成酶只能在已有的引物的3'端添加,不能从头合成. 自然情况下,DNA复制的时候也是有引物(RNA)的.

桓菡宁1719分子生物学实验中所涉及的引物有哪几种,各有什么用途和特点 -
孙绿满19560193514 ______[答案] 实验中的引物都是人工合成的短链DNA,用于PCR或者测序.同样的东西,可以不叫引物,用于Gel shift assay,测DNA结合蛋白的结合活性. 自然界所存在的引物都是短链RNA,见于DNA合成.

桓菡宁1719合成引物和测序引物 -
孙绿满19560193514 ______ 在高中教材上的PCR技术中就需要合成引物.而合成引物之前,当然需要测序引物.然后在化学合成什么的.测序引物分自带引物和通用引物,自带引物是自己设计的PCR上的某段序列或者是基因工程的载体上的某段序列、通用引物就是购买载体(简单点说就是用买来做实验的载体准备的几段附赠的测序引物.)测序必须为特异性引物,不能为随机、兼并、不纯、带荧光标记、长度过长引物.尤其是基因工程的引物.更加严格.长度要控制在15-30之间、而PCR的要求比较低,因为PCR仅仅是为了扩充已知序列、

桓菡宁1719什么是qPCR引物? -
孙绿满19560193514 ______[答案] 就是quantitative PCR(定量PCR) 引物 实时定量PCR可以用于DNA技术,RNA及蛋白质分析和诊断

桓菡宁1719实时定量pcr - ------做实时定量PCR和rtPCR能用一样的引物吗? -
孙绿满19560193514 ______ 不一样啊,通常情况下realtime PCR的引物长度会比较短一点 如果你的RT-PCR引物在300以内,应该做realtime也没问题,反正之前有用过的BIODAI就是这样的.RT-PCR逆转录部分加的是随机或者oligo引物啊,并非扩出目的基因啊,得到的cDNA可以做QPCR或者普通PCR,这个时候引物是一样的,只是浓度不同.

(编辑:自媒体)
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