转染效率荧光图

祖裘饺903几种细胞转染技术原理和特点分析 -
成弦婷19842742785 ______ 转染方法的选择对实验结果影响很大,不少转染方法都需对细胞数量,DNA与转染试剂比例,培养及检测时间进行优化.传统的转染技术,如DEAE右旋糖苷法,磷酸钙法,电穿孔法,脂质体法各有利弊,其主要原理及应用特点见下表:转染方...

祖裘饺903基因会表达吗 -
成弦婷19842742785 ______ 1 可能会造成你说的那种从你被阻断的基因的其实密码子开始,到你的抗性基因上的某个三联终止密码子上结束.2 抗性基因是可以正常表达的.3 在操作的时候可以在插入序列(在你的例子中,就是那个抗性基因)的启动子之前加上3个读码框不同的终止密码子(这个可以通过引物引入),这样可以完全避免你所担心的现象.

祖裘饺903如何鉴定细胞的转染效率? -
成弦婷19842742785 ______[答案] 通常是带上一个报告基因,比如绿色荧光蛋白,然后在镜下观察看发光的和不发光的细胞比

祖裘饺903怎么鉴别外源基因和内源基因的表达 -
成弦婷19842742785 ______ 将带His标签的目的基因转染细胞后,用His抗体进行免疫印迹实验,请问:1)此时得到的蛋白表达水平仅为外源基因(即转入的基因)的表达吗?2)如果用目的基因蛋白抗体进行免疫印迹实验,得到的蛋白表达水平是否应为外源基因和内源基...

祖裘饺903真核细胞基因的转染方法步骤是什么?求大神帮助 -
成弦婷19842742785 ______ 1.配置TBS-D溶液 100mlTBS加入20%葡萄糖溶液0.5ml,至终浓度为1%. 2.配置DEAE-dextran-DNA-TBS-D转染液 DEAE-dextran 1mg/ml DNA(超螺旋) 5-10ug/ml(DNA浓度根据细胞种类、细胞密度及质粒种类决定,最适浓度经预实验确定)...

祖裘饺903回转窑安装步骤、方法和要求是什么求大神帮助 -
成弦婷19842742785 ______ 回转窑的安装步骤如下: 一、底座安装: 1.将底座安装在基础墩上; (1)将底座上划出纵横向中心线; (2)底座的放置位置:其纵横向中性线应与中心标板重合. 2.用斜度规找正倾斜度. 二、托轮组的安装:将零部件清洗干净,按照配合字...

祖裘饺903想请教您关于流式的问题,用一个双荧光载体转染细胞,其中用RFP验证转化效率,GFP验证工作效率 -
成弦婷19842742785 ______ 首先,你这个实验室双色的,就要做compensation.技师应该和你说明的啊.如果你自己做的话,我简单和你说一下:RFP和GFP的激发光谱有部分是重叠的,所以必须在检测的时候去掉重叠的部分(compensation).你必须有三组细胞来做...

祖裘饺903细胞稳定转染的问题 -
成弦婷19842742785 ______ 使细胞由荧光显色并且增殖后也有荧光,这个得是稳转株.最好的方法是转染表达荧光蛋白的慢病毒,当然前提是你的细胞可以转染慢病毒.你可以自己做,也可以去公司买,不贵.不能转染慢病毒,或者说慢病毒转染效率低的,可以用脂质体转染,把荧光蛋白构建在真核表达载体(重组)上,转染细胞.上述两种方法转染后,用流式细胞仪等方法筛选稳转株,就可以了.

祖裘饺903如何用流式细胞术测定细胞转染率?
成弦婷19842742785 ______ 转染成功一般都会表达GFP蛋白,这个蛋白在流式上面可以用FL1通道检测到.转染成功的有表达,不成功的没表达,很容易算出细胞转染率.

祖裘饺903colo205的转染问题有人养过colo205吗?我要做shRNA方面的研究,想通过脂质体把shRNA转到colo205中,但是由于它是半悬浮细胞,我对转染效率以及转... -
成弦婷19842742785 ______[答案] 把siRNA带个荧光标记,然后细胞内源表达另一种颜色的荧光蛋白,这样就可以统计转染效率了,筛选也可以通过这样的荧光来区分