qpcr中cdna浓度多少合适

於山龚783【急】【高分】在做Real - Time PCR之前,cDNA的浓度要调平吗?cDNA浓度怎么算啊? -
伏朗轰17212471372 ______ 看你实验要求,一般实验设计中没必要这么做 现在做绝对定量的很少,如果相对定量,只要找好对照基因即可. 你可能想检查自己的某个基因A表达是否发生变化了,提取了两个样品的cDNA,这种情况下,无需将两个样品的cDNA调整到相同浓度.而是找一个在两个样品中表达基本认为不变的持家基因B,然后对两个样品中的A和B同时都进行实验.通过检测不同样品中A与B的比值,就可以知道A基因表达是否发生变化了.

於山龚783荧光定量cdna和普通pcr的cdna有什么差别 -
伏朗轰17212471372 ______ 没有太大的差别.只是作为定量或者半定量的cDNA,要求质量比较高,才能使结果更可靠.非定量普通PCR的cDNA要求没那么严格,只要能正常扩增出目标片段即可.

於山龚783分离mRNA过程中,如果RNA有DNA污染会有影响吗 -
伏朗轰17212471372 ______ 会有影响.因为提取的RNA有DNA污染,那么反转录以后的cDNA也就有基因组DNA污染,这样,扩增cDNA.都会出现杂带或非特异性扩增,对实验结果不好. 由一个DNA分子,边解旋,边转录.利用细胞核内部的游离核糖核苷酸合成.合成...

於山龚783做荧光定量PCR前要做总RNA定量吗 -
伏朗轰17212471372 ______ 在逆转录之前必须要检测总RNA浓度:1、为下一步逆转录加入总RNA的量提供依据.2、通过260/280比值判定提取的总RNA纯度.

於山龚783可不可以将不同浓度梯度的cDNA在同一板做定量PCR对基线和CT值得设置有影响吗? -
伏朗轰17212471372 ______[答案] 没有影响,标准曲线就是这样做出来的.梯度稀释的模板有不同的Ct值,然后就可以根据这个做标准曲线了.

於山龚783什么是总RNA 和Poly A RNA -
伏朗轰17212471372 ______ 你说的实验应该是RT-qPCR,这个实验的主要目的就是检测RNA的含量的,所以一开始其实是很难给出一个具体的值的.通常建议根据所用的逆转录酶每个反应的RNA的量的大致需求,先完成逆转录反应,例如,下面就列出了某一种逆转录酶要求的模板范围.逆转录酶越好,这个范围就会越宽,主要是可以用的RNA量就可以更少.totalRNA——1pg-5μgpoly(A)RNA——0.1pg-500ngspecificRNA——0.01pg-500ng等到将RNA都逆转录为cDNA后,再进行qPCR的实验.这时候可以将cDNA稀释几个梯度,以获得理想的Cq值.

於山龚783RT - PCR中cDNA的量多了会不会导致没有条带 -
伏朗轰17212471372 ______ 不会,这是两回事,量太多的话说明身体有问题得就医,如果不调理好对身体很危害的

於山龚783如何通过qPCR比较不同基因的表达 -
伏朗轰17212471372 ______ 提取样本mRNA,测提取的浓度,按比例调整浓度保持相近的起始量,做反转录合成cDNA,然后用配套的荧光定量试剂配置上样体系,就可以在Real Time-PCR仪上跑了,然后观察仪器上实时显示的数据和最终结果分析比较基因表达差异

於山龚783qpcr的结果是进行测序还是电泳 -
伏朗轰17212471372 ______ qpcr量进行检测数要看转录组表达量少吧与测序做比没明确意义实要做需要整转录本都进行定量才能比结

於山龚783poly(A) RNA 是什么意思 -
伏朗轰17212471372 ______ 多聚腺嘌呤核糖核苷酸 就是很多个A连在一起组成的RNA啦 原核生物信使RNA的尾部就是POLY A