质粒小提试剂配方

竺明慧3340QBT 缓冲液 什么意思 ?如何配制? -
祝垂妍18714151886 ______ 750 mM NaCl; 50 mM MOPS, pH 7.0; 15% isopropanol (v/v); 0.15% Triton® X-100 (v/v) To make 1 liter of solution, dissolve 43.83 g NaCl, 10.46 g MOPS (free acid) in 800 ml distilled water. Adjust the pH to 7.0 with NaOH. Add 150 ml pure ...

竺明慧3340细菌基因组DNA的提取法(CTAB/NaCl 法)中,CTAB/NaCl 的配制方法??? -
祝垂妍18714151886 ______ CTAB提取液: NaCl 1.4M CTAB(w/v) 2% Tris•Cl 100mM EDTA 20mM 巯基乙醇 0.2% 注:先将除巯基乙醇之外的药品配好,高压蒸汽灭菌之后加入巯基乙醇; 上面是我提植物基因组DNA的CTAB配方,提的效果很不错

竺明慧3340质粒提取中每一步的作用每一步的具体作用,如加溶液1,2,3的作用··· -
祝垂妍18714151886 ______[答案] 简单的说:溶液一:重悬菌体,提供缓冲环境.溶液二:氢氧化钠和SDS裂解菌体细胞壁、在细胞膜上穿孔,释放细胞内的质粒.溶液三:中和氢氧化钠、SDS中的钠被钾替换,吸附菌体产生沉淀.复杂的说:让我们先来看看溶液I的作...

竺明慧3340biospin 质粒DNA小量提取试剂盒中有瓶试剂叫wash buffer,需要加入无水乙醇,请问加入无水乙醇的作用是什么?今天做胶回收的时候不小心选择了没有加... -
祝垂妍18714151886 ______[答案] 1.wash buffer中加入无水乙醇后,终浓度差不多就是70%的乙醇溶液了,在沉淀的DNA中,由于过多的盐杂质存在,影响... kb大小的片断,就没有办法再被PDS共沉淀了.所以碱处理的时间要短,而且不得激烈振荡,不然最后得到的质粒上总会有大量...

竺明慧3340请教质粒小提 -
祝垂妍18714151886 ______ 大提质粒和小提质粒的基本原理是一样的,都是通过一定的方法(如加碱裂解)使在细菌内大量扩增的质粒释放出来,然后经过去蛋白去RNA等一系列步骤纯化DNA,最终将DNA提取出来.区别: 1. 大提用于大量菌液的提取,100ml-500ml 均可,而小提用的菌液量很少,一般1.5-5ml. 2. 2.一般试剂盒中大提比小提多了溶菌酶、异丙醇(回收沉淀核酸)、含一定量PEG的氯化物(回收质粒DNA)及乙酸铵等,其作用及目的都是有利于细菌的裂解和质粒的纯化,所以大提的产物比小提的量多很多,而且纯度很高. 3. 3.小提一般用于质粒鉴定和对纯度要求不是很高的实验,大提用于质粒的大量提取和转染等纯度要求很高的实验.

竺明慧3340不同质粒提取试剂盒的P1溶液一样吗?
祝垂妍18714151886 ______ 我没这样做过. 我觉得其配方大同小异,但不同厂家的配方、浓度和批次还是有差异,溶液用量也不同,对后续步骤还是有影响的,所以不建议混用.对P2和P3,我是一定不敢,因为涉及碱液裂解和中和,一旦量不匹配,后果很糟糕. 但如果你的这次试验对质粒质量要求不是那么高,又比较着急,就当回小白鼠试试呗,别忘了把结果告诉大家,共同学习.

竺明慧3340SDS碱裂解法制备质粒DNA的具体操作步骤是怎么样的?那位大侠给力点,帮下忙 -
祝垂妍18714151886 ______ 细菌质粒是一类双链、闭环的DNA,大小范围从1kb至200kb以上不等.各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份,通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态,但在一定条件下也会可逆地整合到寄主...

竺明慧3340质粒dna提取实验中的实验方法有哪些 -
祝垂妍18714151886 ______ 质粒小,复性容易, 而染色体DNA大 ,不易复性;这导致两种DNA提取采用完全不同的策略.质粒dna提取,为了区分于DNA,都采用首先从混合物中分离出来,然后逐步纯化;而染色体DNA提取的策略则为逐步去除其他杂质,最后剩下的就是DNA了.质粒DNA提取方法有几种,最常见的碱裂解法利用碱变形(加溶液II)后用醋酸溶液快速复性(溶液III),这样使得质粒DNA可以复性而溶解,而GenomeDNA不能复性而沉淀,从而将他们分开.而后面的纯化如除蛋白(酚 、氯仿),除盐(75%酒精),沉淀(酒精、异丙醇等)两者类似.当然两者都有很粗略的简易提法,那就完全大相径庭啦.