溶解曲线qpcr

通堵伦1552荧光定量pcr溶解曲线为什么会有一个急剧的上升连着急剧下降,形成一个峰. -
郑斌武15853387670 ______ 随着温度升高,当温度达到Tm值时候,DNA就会变性分成单链的,此时荧光染料不能结合NDA所以检测的荧光型号越来越弱. 你说的出现的峰是荧光性号对温度求导后得到的曲线图,出现峰是因为在接近Tm值的位置荧光性号下降的斜率很快导致在对温度求导后出现峰. 出现单峰说明没有非特异性的结合和引物二聚体的产生.

通堵伦1552实时定量PCR的绘制溶解曲线应该从多少度开始升温 -
郑斌武15853387670 ______ 如果扩增产物只有目标序列的话就应该只有一个峰的. 1.简单的说来,溶解曲线就是在采用荧光染料法进行实时定量PCR时采用的一种分析手段.当体系的温度逐渐升高的时候,体系中的PCR产物慢慢的由双链变成单链,这是一个逐渐变化的...

通堵伦1552求助,荧光定量PCR扩增曲线和溶解曲线 -
郑斌武15853387670 ______ 实时PCR产物的Tm值大小一般会在80deg;上下,所以溶解曲线不必从40deg;开始,可以从65deg;开始进行溶解曲线绘制,另外在产物之前出现的小峰,同时也在阴性对照中出现了,应该是引物二聚体或者是非特异的扩增.

通堵伦1552RT - PCR融解曲线详解 -
郑斌武15853387670 ______[答案] 融解曲线是荧光定量PCR仪出现后为了考察染料法结果的特异性产生的.大家使用荧光定量PCR的目的(也是荧光定量PCR的宣称优点)有快速、准确及无污染,其中快速的前提之一是不用跑电泳就可以通过扩增曲线考察初始拷贝数的量;准确是因...

通堵伦1552q - pcr融解曲线主峰前面有个向下的小峰,怎么回事? -
郑斌武15853387670 ______ 有点波动可能是由于仪器精密度引起的,不必太在意

通堵伦1552rt - pcr中没有溶解曲线的原因是什么?(Ct值有的) -
郑斌武15853387670 ______ 溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变...

通堵伦1552RT - PCR融解曲线详解 -
郑斌武15853387670 ______ 融解曲线是荧光定量PCR仪出现后为了考察染料法结果的特异性产生的.大家使用荧光定量PCR的目的(也是荧光定量PCR的宣称优点)有快速、准确及无污染,其中快速的前提之一是不用跑电泳就可以通过扩增曲线考察初始拷贝数的量;准...

通堵伦1552如何调整实验条件优化qPCR的效率 -
郑斌武15853387670 ______ 1、尽量少写 多层的for嵌套,影响效率.2、用memcache或者其他缓存技术,将常用的 数据字典数据缓存到内存中,也可以缓存到文本文件中,节省数据库连接数量及数据库的资源.3、尽可能少的去连接数据库,减少连接数量.4、数据库查询,少用select * ,建议用 select 字段1、字段2...还有很多...

通堵伦1552实时定量pcr引物tm值和溶解曲线横坐标的tm是一回事么? -
郑斌武15853387670 ______ TM是当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度.Tm对于设定PCR退火温度是必需的.Tm可采用下列公式计算:Tm=2(A+T) + 4(G+C).

通堵伦1552实时荧光定量PCR结果中溶解曲线的 -
郑斌武15853387670 ______[答案] 你用的是什么型号的PCR仪?每个PCR仪中的缩写意思都是不一样的